UNIVERSIDAD NACIONAL MICAELA BASTIDAS DEAPURIMAC

FACULTAD DE INGENIERIA
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

DETERMINACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

RESUMEN
Las enzimas son protenas polmeros de residuos amino acidicos unidos mediante enlaces
peptdicos, que tiene la funcin de ser catalizadores de las reacciones qumicas del
metabolismo celular. La produccin de enzimas, de actividades especficas, es seguida por
una purificacin y una estandarizacin del producto se agregan diversos excipientes (otras
protenas y azucares, por ejemplo), por lo que un preparado enzimtico comercial no es
100% puro. De manera de cuantificar la enzima presente en una formulacin comercial se
realizan determinaciones de su actividad enzimtica y del contenido de protenas.
I.

INTRODUCCION

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Por medio de este informe queremos dar muestra de los resultados de la prctica realizada
en el laboratorio, donde analizaremos los factores que pueden modificar la actividad
enzimtica de la catalasa. Donde comprenderemos la importancia de titular las muestras
finales. Por medio de la titulacin se logra comprobar cuantitativamente la concentracin
Las enzimas son protenas que catalizan todas las reacciones bioqumicas. Adems de su
importancia como catalizadores biolgicos, tienen muchos usos mdicos y comerciales.
Un catalizador es una sustancia que disminuye la energa de activacin de una reaccin
qumica. Al disminuir la energa de activacin, se incrementa la velocidad de la reaccin.
Las reacciones metablicas son catalizadas por enzimas, estas solo catalizan un tipo de
reaccin y actan usualmente sobre un nico sustrato, el sustrato es la sustancia sobre la
cual la enzima produce su funcin, aunque en excepciones trabaja con un grupo de
sustratos similares.
Las enzimas siendo componentes orgnicos son catalizadoras de reacciones especficas, a
diferencia delos catalizadores inorgnicos. Los grados de especificad varan segn la
enzima y el sustrato o el grupo de sustratos. La catalasa es una enzima muy especfica y
descompone el perxido de hidrogeno aun pH es 7.0. Para medir la reaccin producida es
necesario titular la muestra con permanganato de potasio y despus con cido sulfrico
como se ve continuacin.
La experimentacin con la Catalasa es uno de los principales laboratorios que se realizan,
esta es sencilla de extraer y abunda.
En el informe se encontrar con los diferentes datos y resultados obtenidos y evaluados por
la experimentacin y comprobacin en el laboratorio, en estos se consigna la concentracin
y absorbancia, as mismo se calcula el tiempo de accin de la enzima sobre diferentes
Buffers o amortiguadores biolgicos que manejan diferentes PH.

I.

II.

OBJETIVOS

Desarrollar una curva patrn de calibracin

Determinar la actividad enzimtica.

MARCO TEORICO
II.1.

ACTIVIDAD ENZIMATICA

Se define actividad enzimtica (U) como la cantidad de enzima que cataliza la conversin
de 1 mol de sustrato en un minuto. La actividad especfica es el nmero de unidades de

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enzima por miligramo de protena (U/mg prot) o por mililitro de disolucin (U/ml).
Recientemente, el Sistema Internacional de unidades (SI) ha definido la unidad de actividad
enzimtica como la cantidad de enzima que transforma 1 mol de sustrato por segundo. Esta
unidad se llama katal (kat). Como 1 mol son 106 moles y 1 minuto son 60 segundos,
resulta que 1 katal equivale a 60 x 106 U. Esta unidad es muy grande, de forma que se
utilizan frecuentemente los submltiplos como el microkatal (kat, 10-6 kat) o el nanokatal
(nkat, 10-9 kat).

Las enzimas actan de acuerdo con la siguiente secuencia: La enzima (E) y el sustrato
(S) se combinan para formar un complejo intermedio enzima sustrato (E-S), el cual se
descompone formando un producto y regenerando la enzima.

Las enzimas son protenas con capacidad de catalizar reacciones biolgicas. Igual que los
catalizadores inorgnicos, aumentan la velocidad para alcanzar el equilibrio de la reaccin.
El mecanismo por el cual las enzimas incrementan la velocidad de la reaccin es
reduciendo la energa libre de activacin requerida para la transformar un sustrato al
producto correspondiente, sin afectar la constante de equilibrio.
La actividad de una enzima se evala en funcin de la velocidad de la reaccin. La cintica
enzimtica estudia la velocidad de la reaccin, los factores que la modifican y el
mecanismo de la misma. Los factores fisicoqumicos que modifican la actividad de la
enzima son: concentracin del sustrato, concentracin de la enzima, pH, temperatura,
fuerza inica, inhibidores. Leonor Michaelis y Maud Menten en 1913, propusieron un
modelo clsico para el estudio de la cintica enzimtica. Este modelo consiste en graficar la
velocidad de la actividad enzimtica y la concentracin del sustrato. Esta representacin
grfica permite determinar la constante de Michaelis-Menten (KM) al interpolar la mitad de
la velocidad mxima (Vmx). En esta prctica se emplear la enzima catalasa para analizar
algunos aspectos de la cintica enzimtica. La catalasa utiliza una molcula de perxido de

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hidrgeno (H2O2) como sustrato donador de electrones y otra molcula de H2O2 como
oxidante o aceptor de electrones.
Donde:
A y B = Sustratos
C y D = Productos
v1 = Velocidad de reaccin para formar productos
v2 = Velocidad de reaccin para formar reactivos
2 H2O2

catalasa

2 H2O + O2

La catalasa est contenida en los peroxisomas de eritrocitos, mdula sea, mucosas, rin e
hgado. Su funcin es la descomposicin del H2O2 formado por accin de las oxidasas.

II.1.1. Factores que afectan la actividad enzimtica

Concentracin del sustrato.- A mayor concentracin del sustrato, a una

concentracin fija de la enzima se obtiene la velocidad mxima. Despus de que
se alcanza esta velocidad, un aumento en la concentracin del sustrato no tiene
efecto en la velocidad de la reaccin.
Concentracin de la enzima.- Siempre y cuando haya sustrato disponible, un
aumento en la concentracin de la enzima aumenta la velocidad enzimtica
hacia cierto lmite.
Temperatura.- Un incremento de 10C duplica la velocidad de reaccin, hasta
ciertos lmites. El calor es un factor que desnaturaliza las protenas por lo tanto
si la temperatura se eleva demasiada, la enzima pierde su actividad.
pH.- El pH ptimo de la actividad enzimtica es 7, excepto las enzimas del
estmago cuyo pH ptimo es cido.

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Presencia de cofactores.- Muchas enzimas dependen de los cofactores, sean

activadores o coenzimas para funcionar adecuadamente. Para las enzimas que
tienen cofactores, la concentracin del cofactor debe ser igual o mayor que la
concentracin de la enzima para obtener una actividad cataltica mxima.

II.1.2. Regulacin de la actividad enzimtica

Una molcula de enzima no tiene por qu actuar siempre a la misma velocidad. Su
actividad puede estar modulada por:

Cambios en el pH
Cambios en la temperatura
Presencia de cofactores
Las concentraciones del sustrato y de los productos finales
Presencia de inhibidores
Modulacin alostrica
Modificacin covalente
Activacin por proteolisis
Isoenzimas

II.1.2.1. Efecto del pH sobre la actividad enzimtica

Los enzimas poseen grupos qumicos ionizables (carboxilos
-COOH; amino -NH2; tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas
laterales de sus aminocidos. Segn el pH del medio, estos grupos
pueden tener carga elctrica positiva, negativa o neutra. Como la
conformacin de las protenas depende, en parte, de sus cargas
elctricas, habr un pH en el cual la conformacin ser la ms
adecuada para la actividad cataltica (Figura de la derecha). Este es el llamado pH ptimo.
La mayora de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Desviaciones de pocas
dcimas por encima o por debajo del pH ptimo pueden afectar drsticamente su actividad.
As, la pepsina gstrica tiene un pH ptimo de 2, la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo
tiene a pH 10 (Figura de la izquierda). Como ligeros cambios del pH pueden provocar la

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desnaturalizacin de la protena, los seres vivos han desarrollado sistemas ms o menos

complejos para mantener estable el pH intracelular: Los amortiguadores fisiolgicos.

II.1.2.2.

Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimtica

En general, los aumentos de temperatura aceleran las

reacciones qumicas: por cada 10C de incremento, la
velocidad de reaccin se duplica. Las reacciones
catalizadas por enzimas siguen esta ley general. Sin
embargo, al ser protenas, a partir de cierta temperatura,
se empiezan a desnaturalizar por el calor. La
temperatura a la cual la actividad cataltica es mxima
se llama temperatura ptima (Figura de la derecha). Por
encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de
la reaccin debido a la temperatura es contrarrestado
por la prdida de actividad cataltica debida a la
desnaturalizacin trmica, y la actividad enzimtica
decrece rpidamente hasta anularse.

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II.1.2.3. Efecto de los cofactores sobre la actividad enzimtica

A veces, un enzima requiere para su funcin la presencia de sustancias no proteicas que
colaboran en la catlisis: los cofactores. Los cofactores pueden ser iones inorgnicos como
el Fe++, Mg++, Mn++, Zn++ etc. Casi un tercio de los enzimas conocidos requieren
cofactores. Cuando el cofactor es una molcula orgnica se llama coenzima. Muchos de
estas coenzimas se sintetizan a partir de vitaminas. En la figura de la izquierda podemos
observar una molcula de mioglobina (protena que transporta oxgeno al tejido muscular) y
su coenzima (el grupo hemo, representado en color verde). Cuando los cofactores y las
coenzimas se encuentran unidos covalentemente al enzima se llaman grupos prostticos. La
forma catalticamente activa del enzima, es decir, el enzima unido a su grupo prosttico, se
llama holoenzima. La parte proteica de un holoenzima (inactiva) se llama apoenzima, de
forma que:
Apoenzima + grupo prosttico= holoenzima

II.1.2.4.

Efecto de las concentraciones sobre la actividad enzimtica

La velocidad de una reaccin enzimtica depende de la concentracin de sustrato. La

Figura de la derecha muestra la velocidad de una reaccin enzimtica a 6 concentraciones
distintas de sustrato.

Adems, la presencia de los productos finales puede hacer que la reaccin sea ms lenta, o
incluso invertir su sentido (Figura inferior).

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II.1.2.5.

Efecto de los inhibidores sobre la actividad enzimtica

Ciertas molculas pueden inhibir la accin cataltica de un enzima: son los inhibidores.
Estos inhibidores bien pueden ocupar temporalmente el centro activo por semejanza
estructural con el sustrato original (inhibidor competitivo) o bien alteran la conformacin
espacial del enzima, impidiendo su unin al sustrato (inhibidor no competitivo) (Figuras
inferiores).

II.1.2.6.

Modulacin alostrica de la actividad enzimtica

Hay enzimas que pueden adoptar 2 conformaciones interconvertibles llamadas R (relajada)

y T (tensa). R es la forma ms activa porque se une al sustrato con ms afinidad. Las
formas R y T se encuentran en equilibrio R <==> T (Figura inferior):

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Ciertas sustancias tienden a estabilizar la forma R. Son los llamados moduladores positivos.
El propio sustrato es a menudo un modulador positivo. Las molculas que favorecen la
forma R pero que actan sobre una regin del enzima distinta del centro activo son los
activadores alostricos .

Ciertas sustancias tienden a estabilizar la forma R. Son los llamados moduladores positivos.
El propio sustrato es a menudo un modulador positivo. Las molculas que favorecen la
forma R pero que actan sobre una regin del enzima distinta del centro activo son los
activadores alostricos (Figura inferior izquierda).

Las sustancias que favorecen la forma T y disminuyen la actividad enzimtica son los
moduladores negativos. Si estos moduladores actan en lugares distintos del centro activo
del enzima se llaman inhibidores alostricos (Figura superior derecha)
II.1.2.7.

Efecto de la modificacin covalente sobre la actividad enzimtica

Otros enzimas pasan de una forma menos activa a otra ms activa unindose
covalentemente a un grupo qumico de pequeo tamao como el Pi o el AMP. Tambin se
da el caso inverso, en el que un enzima muy activo se desactiva al liberar algn grupo
qumico. En las enzimas de las vas degradativas del metabolismo, la forma fosforilada es
ms activa que la no fosforilada, mientras que en las vas biosintticas ocurre lo contrario.
En las figuras inferiores se ilustra la activacin de una protena por fosforilacin.

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II.1.2.8.

Activacin proteoltica de la actividad enzimtica

Algunos enzimas no se sintetizan como tales, sino como protenas precursoras sin actividad
enzimtica. Estas protenas se llaman proenzimas o zimgenos. Para activarse, los
zimgenos sufren un ataque hidroltico que origina la liberacin de uno o varios pptidos.
El resto de la molcula proteica adopta la conformacin y las propiedades del enzima
activo. Muchos enzimas digestivos se secretan en forma de zimgenos y en el tubo
digestivo se convierten en la forma activa. Es el caso de la a-quimotripsina, que se sintetiza
en forma de quimotripsingeno (Figura superior). Si estos enzimas se sintetizasen
directamente en forma activa destruiran la propia clula que las produce. As, la tripsina
pancretica (una proteasa) se sintetiza como tripsingeno (inactivo). Si por alguna razn se
activa en el propio pncreas, la glndula sufre un proceso de autodestruccin (pancreatitis
aguda), a menudo mortal.

II.1.2.9. Regulacin de la actividad enzimtica por medio de isoenzimas

Algunos enzimas tienen distinta estructura molecular aunque su funcin biolgica es
similar. Se llaman isozimas o isoenzimas. Estas diferencias de estructura se traducen en
ligeros cambios en sus propiedades, de forma que cada isozima se adapta perfectamente a

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la funcin que debe realizar. As, podemos observar la existencia de isoenzimas en funcin
de:

El tipo de tejido: Por ejemplo, el lactato deshidrogenasa presenta isozimas distintos

en msculo y corazn.
El compartimento celular donde acta: Por ejemplo, la malato deshidrogenasa del
citoplasma es distinta de la de la mitocondria.
El momento concreto del desarrollo del individuo: Por ejemplo, algunos enzimas de
la glicolisis del feto son diferentes de los mismos enzimas en el adulto.

II.2.

INHIBIDORES ENZIMTICOS

Son molculas que se unen a enzimas y disminuyen su actividad puesto que el Bloqueo de
una enzima puede matar a un organismo patgeno o corregir un desequilibrio metlico. Sin
embargo no todas las molculas que se unen a las enzimas sin inhibidores, los activadores
enzimticos se unen a las enzimas y se incrementan su actividad.
La unin de un inhibidor puede impedir la entrada del sustrato al sitio activo de la enzima y
obstaculizar que la enzima catalice su reaccin correspondiente.
La unin del inhibidor puede ser reversible e irreversible. Normalmente los inhibidores
irreversibles reaccionan con la enzima de forma covalente y no clasifican su estructura
qumica a nivel de residuos esenciales de los aminocidos necesarios para la actividad
enzimtica.
En cambio los reversibles se unen a la enzima de forma no covalente donde da lugar a
diferentes tipos de inhibicin dependiendo si el inhibidor se una a la enzima, al complejo:
enzima sustrato o ambos

Se unen a las enzimas mediantes interacciones no covalentes= puentes de

hidrogeno, enlaces inicos
Los inhibidores y el sitio activo se combinan para producir una unin fuerte y
especifica. Al contrario que ocurre con el sustrato y los inhibidores irreversibles no
experimentan reacciones qumicas cuando se une a la enzima y pueden ser
eliminados fcilmente por dilucin o por dilisis.

II.2.1.

TIPOS DE INHIBIDORES
3.2.1.1 Inhibidor Reversible:
II.2.1.1.1. Inhibicin Competitiva:

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El sustrato y el inhibidor no se pueden unir a la misma enzima al mismo tiempo, esto ocurre
cuando el inhibidor tiene afinidad por el sitio activo de una enzima en el que se una el
sustrato. El sustrato y el inhibidor compiten por el acceso al sitio activo de la enzima.
Este tipo de inhibidor se puede superar con concentraciones suficientes altas del sustrato, es
decir dejando afuera el inhibidor.

II.2.1.1.2. Inhibicin Mixta:

El sustrato en el inhibidor afecta la unin del sustito y viceversa; este tipo de inhibidor se
puede reducir pero no se puede superar al aumentar las concentraciones del sustrato aunque
si se dan las cosas que se unan el sitio activo.
Aunque es posible que los inhibidores de tipo mixta se unen al sitio activo (efecto
alosterico)
Donde el inhibidor se une a otro sitio activo que no es el sitio activo de la enzima todo esto
es un sitio alosterico cambia con la formacin da la afinidad del sustrato por el sitito activo
reducido.
II.2.1.1.3. Inhibicin No Competitiva:
Es una forma de una inhibicin mixta donde la unin del inhibidor con la enzima reduce su
actividad pero no acepta la unin del sustrato. El grado de inhibicin depende de su
concentracin

II.2.1.1.4. Inhibidor Irreversible:

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La inhibicin irreversible es diferente de la in activacin enzimtico reversible. Los

inhibidores irreversibles son generalmente especficos para un tipo de enzima y no
inactivan todas las protenas.
No funcionan destruyendo la estructura protenica, sino alterando especficamente la
estructura tridimensional del sitio activo inhabilitndola.
Los inhibidores irreversibles dan lugar a una inhibicin dependiente del tiempo y por ello
su potencia no puede ser caracterizada mediante la determinacin del valor. Esto se debe a
la cantidad de enzima activa a la concentracin dada de inhibidor irreversible ser diferente
dependiendo del tiempo de pre incubacin del inhibidor con la enzima.

II.3.

Determinacin de la actividad enzimtica

Con respecto a la determinacin de la actividad de la enzima, debemos recordar que la

actividad enzimtica:

III.

Indica el mximo potencial cataltico de una enzima y est dado por la velocidad
inicial de la reaccin.
La velocidad de reaccin se mide, cuantificando la evolucin del producto o del
sustrato de reaccin en el tiempo, pero este ltimo es ms dificultoso ya que se
utiliza en exceso y las variaciones en coroto tiempo no son notorias.
Se determina las mejores condiciones para la enzima (temperatura y PH) y las
concentraciones saturadas del sustrato.
La medicin de actividad se ve afectado por los siguientes factores:
Denaturacion de la enzima por temperatura
Reversibilidad de la reaccin enzimtica
Inhibicin de la enzima(por producto o inhibidor externo)
Desaturacion de la enzima (baja concentracin de sustrato).
MATERIALES Y EQUIPOS
III.1. Materiales
telas estriles
mecheros
Matraces de 50 a 100ml
tubos de ensayo con tapa estril
pipetas
Canicas
Gradillas
Agua destilada
III.2. Equipos
Autoclave

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Espectrofotmetro
Cocina elctrica
Bao mara
Balanza analtica
III.3. Reactivos
DNS
PDA
Buffer acetato
Mandels celulosa
Solucin de glucosa
IV.
PROCEDIEMIENTO
4.1. Curva patrn:

Preparar glucosa 0.1, 0.3, 0.4, 0.5 mn/ml.

1mg/ml

BUFFER
Acetato
PH 4.9

1.0
+

Sol.

MODE

0.5

1.2

1.3

0.4

0.3

0.2

0.1

1.5 * 3ml

3ml D.N.S

Rx/ 5 minutos a temperatura ebullicin cortar Rx.

Adicionar 5ml de agua destilada
Leo absorbancia 540 nm
Hallar la ecuacin recta.

1.4

1.5

1.1

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4.2. Muestra
Preparar diluciones 1/10, 1/50, 1/100

1ml
BUFFER
4.8

A E = u3

0.5ml
Enzima

5 minutos a 50C
Adicionamos sustrato.
6cm
1cm
1.5

Rx a 50 C * 60 min.
Adicionamos 3ml D.N.S.
5 minutos a temperatura de ebullicin.
Enfriar
Adicionamos 5ml de agua.
Leer la absorbancia a 540mn.

/ml

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V.

RESULTADOS

Cuadro N01: Cuadro que muestra los pesos de papel filtro, el papel filtro
ms la muestra y la biomasa obtenida en la produccin de enzima para el
sumergido.
Sumergido 1
Peso papel
Peso papel
Peso de
filtro (gr.)
filtro ms
biomasa
muestra
(gr.)
(gr.)
0.87
0.88
0.01
Sumergido 2
Peso papel
Peso papel
Peso de
filtro (gr.)
filtro ms
biomasa
muestra
(gr.)
(gr.)
0.88
0.89
0.01
Fuente: Elaboracin propia.
Para biopelicula
Cuadro N02: Cuadro que muestra los pesos de papel filtro, el papel
filtro ms la muestra y la biomasa obtenida en la produccin de enzima
para Biopelicula.
biopelicula 1
Peso papel
Peso papel
Peso de
filtro (gr.)
filtro ms
biomasa ms
muestra (gr.)
tela (gr.)
0.86
0.97
0.11
biopelicula 2
Peso papel
Peso papel
Peso de
filtro (gr.)
filtro ms
biomasa ms
muestra (gr.)
tela (gr.)
0.85
1.01
0.16
Fuente: Elaboracin propia.
El peso de la tela y la biomasa es la siguiente:
Cuadro N03: pesos de la tela y biomasa obtenida en la biopelicula.

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Biopelicula 1
Biopelicula 2
Peso de la
Peso de
Peso de la
Peso de
tela (gr.)
biomasa
tela (gr.)
biomasa
obtenida (gr.)
obtenida (gr.)
0.0838
0.0262
0.0895
0.0705
Fuente: Elaboracin propia.
El grafico de comparacin entre biomasa de sumergido con biomasa
de biopelicula es la siguiente:
PRODUCCION DE
BIOMASA
0.86
0.97

0.85
1.01
BIOPELIC
ULA
0.16
0.0262

SUMERGIDO
0.11

0.0705

GRAFICO N01:

produccion de biomasa
1

0.16

0.11
0.07

BIOMASA
0.03

1
SUMERGIDO

CUADRO N04:

4
BIOPELICULA

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GRAFICO N02:

ACTIVIDAD ENZIMATICA
3.5
3
f(x) = 6.72x - 0.44
R = 1

2.5
2
1.5
1
0.5
0
0.15

0.2

0.25

0.3

0.35

0.4

0.45

0.5

0.55

CUADRO N05:

factor

0.38

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biopelicul
a
Y
X
0.151005
0.578
21
0.154132
0.599
54
0.156813
0.617
1

6.715
sumergid
o
Y
X
0.205212
0.942
21
0.151303
0.58
05
0.174981
0.739
38

-0.436

CUADRO N06: Hallando glucosa

(glucosa)= (BPF +
BM)-(GM)
reemplazando en la
glucosa
glucosa par
biopelicula
G1
G2
G3

glucosa para
sumergido
(mg/ml)
0.121825
0.12600521 G1
11
0.165231
0.12913254 G2
3
0.142872
0.1318131 G3
34

GRAFICO N03:

dilucin

10

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Biopelicula
1

0.49
0.5
0.4
0.3
0.2
0.01

0.1
0

GRAFICO N 04:

Sumergido
2.5
2
1.5
1
0.5
0

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VI.

DISCUSION
Segn Vander (1975); la curva de patrn esta dado con datos reales, los grficos
que se obtienes no son tan ideales, pero esta situacin es un obstculo ya que
dentro de ciertos valores es posible trazar la recta ms probable que une un
aserie de puntos, con el uso de los programas de clculos lo de las
computadoras. Hay que advertir que una respuesta en lineal no se obtiene en
todo el rango de concentraciones posibles sino dentro de un conjunto de valores
que dependen de numerosos factores dependientes del mtodo de medicin. Por
otra parte este tipo de curvas no se limita solamente a la determinacin de un
elemento compuesto qumico si no tiene mltiples aplicaciones. Donde se ve la
linealidad de la lnea recta de la cantidad de glucosa con la absorbancia ya que
como dice el autor esta curva est dada por una serie de factores.
Segn Van Weel (1959); la espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico
ms usado en las investigaciones biolgicas. El espectrofotmetro es un
instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una
solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene
una cantidad conocida de la misma sustancia. Espectro de absorbancia. Cada
especie absorbente, que recibe el nombre de cromgeno, tiene un determinado
espectro de absorcin. El espectro de absorcin es un grfico donde se
representa en ordenadas la absorbancia y en abscisas la longitud de onda. La
medida de la cantidad de luz absorbida por una solucin es el fundamento de la
espectrofotometra de absorcin. En la grfica se ve una relacin entre la
cantidad de absorbancia la cual depender de su cantidad de glucosa y en la
grfica vemos que la absorbancia se obtiene aumentando la absorbancia del tubo

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VII. CONCLUSION
Se desarroll la curva patrn donde el coeficiente de determinacin es de
0.9976.
Se lleg a determinar la actividad enzimtica en unidades usc (unidad Street
close), en la que la absorbancia corregida se obtiene disminuyndole la
absorbancia del tubo blanco; a la vez sirve para llenarla a la grfica y hallar la
cantidad de glucosa residual que queda en el tubo problema y en el tubo testigo.

VIII. BIBLIOGRAFIA
Aebi, H., Catalase in vitro, Methods in Enzymology, 105, 121-126, 1984.
Garzn de la Mora, P., Manual de prcticas de bioqumica Proyecto VI,
Condiciones ptimas para medir una actividad enzimtica, 111-125, 2002.
Maehly, A. C., Chance, B., The Assay of Catalases and Peroxidases, Methods of
Bioquimical Analysis, 1, 357-424, 1956.
Rivas, G., Lpez, L. A., Velasco, A., Regresin no lineal, Revista Colombiana de
Estadstica, 14, 89-102, 1993.