Prctica 1 Cromatografa en papel

Introduccin
Desde a mediados del siglo XX con los primeros procedimientos diseados por el
ruso Mikhail Tswett, la cromatografa ha sido el mejor mtodo de separacin de
materia y ha tenido un papel relevante en todas las ramas de las ciencias.
Actualmente, se considera como una tcnica de separacin extraordinariamente
verstil que presenta distintas variantes. En cada una de ellas, dividimos todos los
materiales de trabajo en dos fases: una fase mvil, en la cual los componentes de
la muestra se encuentran alojados, y la fase estacionaria, encargada de retener
los mismos en su estructura (ya sea slida o un lquido fijado en un slido) al
arrastrar o interactuar con la fase mvil, separando el analito deseado de la
muestra original. De acuerdo al tipo de fase estacionaria, las tcnicas
cromatogrficas se dividen en Cromatografa en columna (la fase estacionaria se
sita dentro de un tubo o columna) y la Cromatografa plana (la fase estacionaria
se sita sobre una placa plana o sobre un papel).
Derivando de la cromatografa plana, la Cromatografa en papel es una tcnica
muy utilizada para realizar anlisis cualitativos debido a que es sencilla de realizar
y no requiere equipamiento complejo. En esta tcnica, la fase estacionaria se
constituye por una tira o circulo de papel filtro, mientras que la fase mvil acta
como un eluyente que ayuda a disolver la muestra. El procedimiento consiste en
colocar una disolucin de la muestra en un extremo del papel filtro en forma de
pequeas gotas. El papel se somete ya sea por goteo o por aadimiento del
lquido que actuar como fase mvil en ese extremo del papel, Al dejarse por un
tiempo, la fase mvil asciende por capilaridad, y esto genera un arrastre dela
muestra, manifestndose de manera visible en el papel con su color caracterstico.
El arrastre est dado por la polaridad que presente cada muestra con respecto al
papel. Entre ms polar sea el compuesto con la fase estacionaria, se retendr ms
en el mismo por adsorcin, por otro lado, entre ms apolar sea la muestra,
avanzar ms rpido con la fase mvil. En resumen, esta tcnica se basa en la
velocidad de desplazamiento diferencial de los solutos al ser arrastrados por una
fase mvil sobre una fase estacionaria.
Metodologa (Reactivos, materiales y mtodo)
1) Reactivos
Agua

Acetona

Alcohol etlico al 96

Cloroformo

Hexano

2) Materiales
Pliegos de papel filtro de
8.4 x 2.5 cm
1 Lpiz HB con punta
fina

Tijeras
Tintas/Bolgrafos
colores (Negro,
Verde y Rojo)

Regla de acero de 30 cm
de
Azul,

3) Mtodos
Los siguientes procedimientos fueron realizados en la prctica.
3.1. Seleccin de la fase mvil (use guantes)
Corte con las tijeras los pliegos requeridos de
papel filtro (8.4 x 2.5 cm como dimensiones),
segn la cantidad de eluyentes que vaya a utilizar.
En cada pliego, trace una lnea media en posicin
vertical con el lpiz HB. En espacios de 1 a 2 cm
de separacin, marque con su bolgrafo las 4 tintas
(negro, azul, verde y rojo, en ese orden). Aada
una o dos gotas del eluyente que quiera evaluar.
Deje actuar el eluyente hasta que aprecie Goteo del eluyente sobre las
marcas de las tintas trazadas
corrimiento de las tintas y seque el papel a
temperatura ambiente. Realice el procedimiento anterior con otro eluyente y un papel
nuevo. Por ltimo, compare los eluyentes a partir del corrimiento de las tintas y seleccione
el mejor en base a este criterio para su utilizacin en el siguiente paso.
3.2. Separacin por capilaridad
En un pliego nuevo de papel con las mismas dimensiones, realice un trazo con el lpiz HB
en forma horizontal a un centmetro de su extremo (a esta se le conoce como Origen). De
esta manera, realice otro trazo en el extremo opuesto del origen a un centmetro del borde
del papel (a este se le llama frente). Despus, marque ligeramente debajo el origen (en
direccin al borde del papel) 4 puntos separados entre 0.5 a 1 cm (esto ayudar a
diferenciar el origen del frente). Luego, marque con el bolgrafo las 4 tintas (negro, azul,
verde y rojo, en ese orden) sobre cada punto (dentro del origen).
Mientras, en un vaso de precipitado (no mayor a 50 ml), aada el eluyente que actuar
como fase mvil hasta una altura de 0.5 cm (que no supere al origen). Despus,
introduzca el papel filtro (el origen debe estar en la parte inferior) en posicin diagonal y
de frente para visualizar el corrimiento. Tape el vaso de precipitado con un vidrio de reloj
para evitar la evaporacin del eluyente. Deje actuar a la fase mvil por unos minutos
hasta que ascienda por capilaridad totalmente (debe visualizarse el corrimiento de las
tintas). Por ltimo, recoja el papel filtro y deje secar a temperatura ambiente. Obtenga las
mediciones de la distancia recorrida de las tintas y el eluyente y la anchura de las
manchas para realizar los clculos correspondientes. Si cuenta con otro eluyente, realice
todo este procedimiento anterior en un nuevo papel filtro.

Resultados y Discusiones
1.1.

Seleccin de la fase mvil

En esta primera parte de la prctica, se realiz la seleccin de la fase mvil a partir de los
eluyentes disponibles, siendo en este caso Agua y Alcohol etlico al 96. Cada eluyente se
le someti a una prueba cromatogrfica al aadirlo en un pliego de papel filtro, marcado
previamente con un trazo del lpiz HB con las 4 tintas del color Negro, Azul, Rojo y verde,

en ese orden, pertenecientes a la marca de bolgrafos Bazic, para despus dejarlo correr
en posicin horizontal por un breve lapso de tiempo. Eso se realiz con el de fin de
determinar cul de los dos eluyentes generaba un menor corrimiento de las tinta.
En el caso del agua, debido a su alta polaridad con respecto al alcohol etlico, no se
observa separacin del lugar donde se mantiene adsorbido. Esto se debe a que los
componentes de las tintas son de naturaleza polar, hacindolos poco o nada solubles en
este eluyente y esto no genera un proceso de corrimiento sobre el papel, por tanto se
descarta su utilizacin como fase mvil en los
siguientes procedimientos.
En el caso del alcohol etlico al 96, tuvo una mejor
respuesta, provocando una separacin ms notoria de
las tintas con respecto al papel filtro, logrando correrse
unos pocos milmetros de su posicin original. El
alcohol etlico obedece un principio qumico que dice
que semejante disuelve a semejante, es decir al Pliego de prueba con agua como fase
agregar este eluyente apolar, el adsorbente arrastrara mvil
los compuestos con l, de esta manera, ciertos
componentes de la tinta que son polares se adsorben
en la fase estacionaria en el lugar de origen, y a
medida que se produce la elucin, van siendo
1 Pliego de prueba con alcohol etlico al
desplazados y solubilizados los componentes apolares 90
junto el disolvente de la fase mvil, provocando as la separacin. Su concentracin es
crucial (96), debido a que entre ms puro llegue a ser, favorecer el corrimiento de
muestras apolares. Por lo tanto, se utiliza este eluyente como fase mvil durante el
desarrollo de la prctica.

1.2.

Separacin por capilaridad

Al tener seleccionado al alcohol etlico al 96 como nuestra fase mvil, se procedi a

realizar la separacin de la tintas por capilaridad. Al realizar los procedimientos
correspondientes, se coloca el pliego de papel marcado por las 4 tintas (Negro, azul, rojo
y verde, en ese orden) en forma diagonal dentro del vaso de precipitado que contena la
fase mvil previamente seleccionada. A continuacin se obtuvieron los siguientes
resultados.

1.2.1. Corrimiento de las tintas

Inmediatamente, el alcohol etlico al entrar en contacto con el papel filtro, ascendi
rpidamente por capilaridad, provocando el corrimiento de las tintas tambin de manera
ascendente. Las 4 tintas experimentaron corrimientos provocados por la fase mvil pero
no de la misma forma, esto se debe a que cada tinta presenta una afinidad distinta con
respecto con la fase mvil. Esto se debe a que cada tinta es un vehculo de naturaleza

lquida que transporta diversos tipos de pigmentos y aditivos y por

tanto, la afinidad de los mismos por otros compuestos es muy
variada.
La tinta que present un mayor corrimiento fue la roja del bolgrafo,
presentando un corrimiento de 5.7 cm con respecto a la lnea de
origen y 3.7 cm de ancho con respecto su primera banda
separada. La tinta roja se compone principalmente de eosina, un
compuesto cido que presenta afinidad con los compuestos
alcalinos. En este caso el alcohol etlico, disolvi de manera Corrimiento inicial
5.4
de las tintas.
favorable la eosina presente en la tinta, provocando su
cm
Tintas
solubilizacin y corrimiento sobre el papel debido a la alta afinidad
5.7
que posee con respecto a la fase mvil, provocando que haya una Negra, Azul, Roja y Verde
cm
dispersin incluso casi al final de la distancia recorrida solo por el
(de izq. a der.)
eluyente. Sin embargo, este no se realiza de manera uniforme y
4.8
la mancha termina por desplazarse hacia otra direccin con
cm
respecto a su punto de partida, a tal grado de que supera la lnea
frente del pliego de papel.
La segunda tinta con mayor corrimiento fue la negra, presentando
un corrimiento de 5.4 cm con respecto a la lnea de origen y 3.4
cm de ancho con respecto la primera banda separada. La tinta
negra se compone principalmente de resina pretratada con
minerales y solventes. Este componente es de origen vegetal, de
consistencia pastosa y es soluble en alcohol. Su corrimiento (al
igual que la eosina) ocurre debido a la afinidad que posee este componente con respecto
a la fase mvil, logrando solubilizarse en el mismo. Sin embargo, debido a su naturaleza
oleosa, no llega a correr tan rpido como la eosina pero si se realiza la separacin
correspondiente.
La tercera tinta en correr fue la azul presentando un corrimiento de 4.8 cm con respecto a
la lnea de origen y 3.8 cm de ancho con respecto la primera banda separada. La tinta
azul se compone de Trifenilmetano azul, pero cabe destacar que este compuesto al ser
una patente, no se tiene informacin concisa con respecto a sus propiedades. SSin
embargo, el componente original, Trifenilmetano, comparte ciertas caractersticas, entre
ellas su alta polaridad. La afinidad de este compuesto con la fase mvil permite su
corrimiento y su separacin con respecto al punto de origen.
La ltima tinta en correr fue la verde, presentando un corrimiento de 3.3 cm con respecto
a la lnea de origen y 1.8 cm de distancia con respecto la primera banda separada. El
componente principal de la tinta verde es ftalocianina, un colorante que se estable a
condiciones extremas como calor y luz. En esta separacin, realiza un corrimiento muy
lento debido a la poca afinidad que tiene con la fase mvil, provocando que su separacin
sea ms lenta a comparacin de las otras tintas.

1.2.2. Parmetros para determinar la separacin cromatogrfica

Una vez realizo el proceso de separacin, se dej secar el pliego de papel, para despus
obtener las medidas mencionadas anteriormente con el fin de calcular los parmetros que
se muestran a continuacin.

1) Tiempo de respuesta (Rf)

Una vez obtenido esto podemos encontrar el factor de retencin o el tiempo de
respuesta (Rf) el cual se define como la relacin entre la velocidad de desplazamiento
del soluto y la del disolvente medidas ambas por el avance hacia un frente (Burriel
Mart, Lucena conde, Arribas Jimeno, & Hernndez Mndez, 1998)1. A partir de este
parmetro podemos definir la competencia que se establece entre los colorantes que se
separaron y la fase mvil al retenerse a la fase estacionaria. Cabe destacar que tanto la
distancia recorrida del disolvente y de la fase mvil fueron tomados a partir de la lnea de
origen. Estos fueron los resultados:

Rf tintanegra =

Rf tintaroja=

5.4 cm
4.8 cm
=0.81 R f tinta azul =
=0.72
6.6 cm
6.6 cm

5.7 cm
3.3 cm
=0.863 Rf tinta verde=
=0.5
6.6 cm
6.6 cm

Al calcular estos parmetros, podemos verificar que hay un mejor tiempo de respuesta
entre ms alto sea el Rf. En el caso de los compuestos que presentaron mayor
corrimiento (tinta roja, negra y azul) tuvieron un Rf ms debido naturaleza apolar,
permitiendo que reaccionarn de manera inmediata con el alcohol etlico, logrando as un
desplazamiento ms rpido de manera ascendente hacia el frente del papel, indicando
que estos son separados ms rpido gracias a la afinidad que tuvieron con la fase mvil.
En el caso de la tinta verde, tuvo el Rf ms bajo, esto se debe a que posee una baja
afinidad con la fase mvil debido a que los dos son de naturaleza polar y por ende su
tiempo de respuesta es menor, logrando separarse lentamente.

2) Selectividad
La selectividad se define como el grado de preferencia de la fase mvil por un
compuesto con respecto a la distancia de la primera mancha ms cercana al origen.

Selectividad tinta roja=

3.3 cm
=0.5789
5.7 cm

Selectividad tinta negra =

3.3 cm
3.3 cm
=0.611 Rf tinta azul =
=0.687
5.4 cm
4.8 cm

Las tres muestras de tintas presentan parmetros regulares muy parecidos en cuanto a la
selectividad de la fase mvil. Con esto podemos demostrar que la separacin no presenta

anomalas y que los compuestos presentaron un corrimiento apto a la polaridad que

poseen.

Conclusin
En el desarrollo de esta prctica se comprendi que la movilidad de los componentes de
una muestra que se desee separar, depende de la afinidad que tenga con la fase mvil y
la polaridad que presente est ltima, ya que es el factor crucial para que pueda
realizarse una separacin cromatogrfica apta. A pesar de que es una tcnica muy
sencilla de realizar, existen inconvenientes que alteran los resultados de la misma, ya sea
la sobre distribucin de las muestras sobre el papel (en este caso,afectando a otras tintas
en su corrimientos) o los factores ambientales (p. ej. calor y la falta de una cmara
cromatogrfica) que afectan a la fase mvil, disminuyendo su cantidad al vaporizarse o el
deterioro de la fase estacionaria. Sin embargo, controlando estos factores, esta tcnica
puede desarrollarse y arrojar resultados favorables. Como futuros qumicos, es importante
conocer y desarrollar los mtodos cromatogrficos, y en base a las competencias
obtenidas, realizarlos de la manera adecuada para aplicaciones en el rea profesional, ya
sea en el sector clnico, industrial e investigacin.

Cuestionario
1. En este sistema cul es la fase mvil y cul la estacionaria?
R= La fase mvil es el alcohol etlico al 96 y acta por afinidad con los compuestos
de las muestras, separando aquellos que sean apolares. La fase estacionara es el
papel filtro, debido que acta como una fase rgida que permite la adsorcin de las
tintas y permite su separacin en la misma.
2. Se us soporte? Cul es la funcin de la cmara?
R= No es necesario el uso de soporte en esta cromatografa. La cmara aporta tanto a
la fase estacionaria como a la mvil condiciones climatolgicas y ambientales con el
fin de que se desarrolle sin problema alguno el proceso de separacin.
3. Cul es la composicin qumica de la fase estacionaria y de la mvil?
R= La fase mvil se compone de etanol, un compuesto alcohlico
conformado por dos carbonos simples con un radical OH.

La fase estacionaria (papel) se compone de celulosa, un biopolmero compuesto de

molculas de -glucosa.

Corrimiento final
de las muestras de
tinta (N,A,R,V)

4. Todas las tintas corrieron igual? Cules son las que mostraron ms
manchas?
R= La mayora (excepto la tinta verde) tuvo un corrimiento de tinta muy
parecido debido a que estos presentaban una alta afinidad con respecto a la
fase mvil. La tinta verde present corrimiento pero fue poco notorio. Ninguna
de las tintas de las muestras no present ms de una mancha.
5. Cul es el Rf de las tintas negras? Entre las tintas negras hubo manchas
que se repitieran?
R= En el caso de esta prctica solo de determin una tinta negra, dando un Rf
de 0.81. No se pudo determinar manchas porque solo se determin una sola
tinta de este color.
6. Hubo manchas que se repitieran entre las tintas del mismo color?
R= No, debido a que solo se determin una muestra por cada tinta en nuestro
papel filtro.
7. Podras mejorar la separacin cromatogrfica?
R= Esta cromatografa puede realizarse mejor si cambamos las dimensiones de la
fase estacionaria para permitir un corrimiento ms prolongado y notorio. Las
condiciones de las mismas pueden controlarse si la realizamos en una cmara
cromatogrfica.
8. Calcula la eficiencia de separacin de las muestras que tuvieron dos manchas o
ms. Qu podras hacer para mejorar la eficiencia de la separacin?
R= Debido a que no hubo ms de dos manchas en las muestras, solo se determin la
eficiencia de las que fueron obtenidas.

Ef negra =16

Ef roja=16

5.4 cm
=50.72
3.4 cm
2

( )

5.7 cm
=49.29
3.7 cm
2

( )

Ef azul=16

Ef azul=16

4.8 cm
=54.85
3.8 cm
2

( )

3.3 cm
=58.66
1.8 cm
2

( )

El nmero de platos tericos en las 4 muestras es demasiado pequeo a comparacin

del lmite mnimo aceptado en la cromatografa de este tipo (mayor a 300). Esto se
debe a que solo se tom en cuenta una mancha por cada muestra para realizar es
clculo, dando como conclusin que las muestras no migraron completamente debido
a la falta de espacio en el papel filtro.
9. Calcula la resolucin de las muestras que tuvieron dos manchas o ms. Qu
podras hacer para mejorar la resolucin de la separacin?
R= Debido a la falta de ms de dos manchas en cada muestras, no pudo determinarse
este parmetro para esta separacin.

10. Cul es la naturaleza qumica de los colorantes utilizados en los bolgrafos?

R= Las estructuras de las tintas negra, azul y roja comparten una afinidad apolar con
respecto a la fase mvil, permitiendo que se solubilizen en el mismo y generen su
corrimiento ascendente por el papel. Mientras que la titna verde presentaba poca
afinidad debido a que en sue estructura presentaba mayor afinidad polar y tuvo un
corrimiento ms lento.
11. Qu tipos de vidrio existen para laboratorio? (Busca en la FEUM)
R= En los aparatos e instrumental de laboratorio se utilizan dos tipos de vidrio:
A) Vidrio de sosa y cal: Se compone entre un 71 y 75% de arena (SiO 2), 12 al 16% de
NaHCO3 Y 10 al 15% de CaO. Este vidrio tiene una superficie lisa y sin poros,
aunque es sensible a los cambios de temperatura.
B) Vidrio borosilicato: Compuesto entre 70 y 80% de SiO 2, 7 al 13% de B2O3, 4 al 8%
de Na2O y 2 al 7% de Al2O3. Posee mayor resistencia qumica y trmica. Es
utilizado en la fabricacin de instrumental requerido para condiciones extremas o
trabajos prolongados.
12. Cmo definiras el frente y el origen?
R= Son los intervalos donde la medicin del recorrido de cada sustancia puede ser
cuantificada sin salirse de los bordes del papel, con la diferencia de que el origen sirve
como punto de partida para determinarlas.
13. Por qu crees que no se utilizan los puntos en los extremos?
R= Porque si realizamos la medicin a partir de ellos, podemos obtener datos con
dimensiones errneas y afectara al clculo de los parmetros que necesiten esos
datos.
14. Por qu deben ser manejados con guantes?
R= Porque las manos secretan cidos grasos, sudor o contienen impurezas que
pueden alterar la composicin del papel al tocarlo directamente, afectando al
corrimiento de la tinta ya sea retardando o inhibiendo la separacin.
15. Por qu esta prctica es imprecisa?
R= Por que el corrimiento de las muestras no ocurre de manera uniforme, afectando a
otras muestras y por ende, altera el reconocimiento y separacin de las mismas.

Glosario

Fase mvil: Es que aquella fase (ya sea liquida o gaseosa) que contiene la
muestra que se desee separar. Esta recorre o traspasa la fase rgida llamada fase
estacionara con el fin de separar el analito de la muestra.

Fase estacionaria: Es un lecho fijo de gran rea superficial. Puede ser un slido
poroso o finamente dividido, o un lquido que ha sido colocado en una capa

delgada sobre un material de soporte inerte. Su funcin es retener la muestra que

se desee separar.
Cromatografa: Es un tcnica de separacin basada en el principio de retencin
selectiva, que permite separar los distintos componentes de una mezcla facilitando
su identificacin y cuantificacin. el fenmeno de separacin ocurre al hacer pasar
una fase mvil fluida (que arrastra a la mezcla, a travs de una fase estacionaria
de naturaleza rgida.

Rf: Se considera como la relacin entre la distancia recorrida por el soluto y por el
eluyente desde el origen de la placa o papel filtro. Tiene un valor constante para
cada compuesto en condiciones cromatogrficas determinadas. Se calcula al
dividir la distancia recorrida por el compuesto sobre la distancia recorrida por el
eluyente.

Resolucin: El grado de separacin o resolucin de dos bandas adyacentes se

define como la distancia entre los picos de las bandas (o centros) dividida entre el
ancho promedio de las bandas.

Sensibilidad: Es la probabilidad de obtener resultados positivos en aquellos datos

que cumplan con un criterio en especfico. Poj ejemplo, se puede calcular la
probabilidad de obtener aquellos pacientes que den positivo a una prueba de VIH
entre aquellos que estn enfermos.

Especificidad: Es la probabilidad de obtener resultados negativos en aquellos

datos que cumplan con un criterio en especfico. Poj ejemplo, se puede calcular la
probabilidad de obtener aquellos pacientes que den negativo a una prueba de BIH
entre aquellos que estn sanos.

Precisin: Es la dispersin del conjunto de valores obtenidos de mediciones

repetidas de una magnitud. Cuanto menor es la dispersin, mayor ser la
precisin.

Exactitud: Es la referencia a cun cerca del valor real se encuentra el valor

medido. En trminos estadsticos, la exactitud est relacionada con el sesgo de
estimacin. Cuando menor sea el sesgo, ms exacta ser la estimacin.

Repetitividad: Es la aptitud de un instrumento de medicin para proporcionar

indicaciones prximas entre s para aplicaciones repetidas de la misma,
mensurando bajo las mismas condiciones de medicin.

Reproducibilidad: Es la proximidad de concordancia entre los resultados de

mediciones del mismo, realizadas bajo condiciones variables de medicin.

Eficiencia: Es el grado de separacin de una muestra en el menor tiempo y las

mejores condiciones posibles.

Bibliografa
1. Burriel Mart, F., Lucena conde, F., Arribas Jimeno, S., & Hernndez Mndez, J.
Qumica analtica cualitativa. Madrid: Paraninfo.1998.
Excelencia UAN. Cromatografa en capa fina. Espaa: Universidad Autnoma de
Madrid. De:
https://www.uam.es/docencia/jppid/documentos/practicas/actuales/guion-p6.pdf
Gennaro, A.R. Remington: Farmacia. 20. edicin. Volumen 1. Mxico: Editorial
Mdica Panamericana. 2003. Pp. 686-689.
Web del profesor. Separacin de cationes por cromatografa de papel. Venezuela:
Universidad de los Andes. De:

http://webdelprofesor.ula.ve/ciencias/rmhr/Index_archivos/Cromatografia_de
_papel.pdf

http://webdelprofesor.ula.ve/ciencias/rmhr/Index_archivos/Cromatografia_de_papel.pdf
https://es.scribd.com/doc/103144800/Practica-2-Cromatografia-de-Papel
http://es.slideshare.net/honey61187/cromatografa-de-papel
http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_en_papel
https://books.google.com.mx/books?id=Av4IIsyH-qcC&pg=PA686&dq=fase+m
%C3%B3vil&hl=es&sa=X&ei=ZvIMVZm9NcLdsATjyoHwBw&ved=0CCUQ6AEwAA
#v=onepage&q=fase%20m%C3%B3vil&f=false
http://es.slideshare.net/luisdracons/cromatografia-5540749

https://www.uam.es/docencia/jppid/documentos/practicas/actuales/guionp6.pdf
https://mx.answers.yahoo.com/question/index?qid=20120813154900AABfp0k
http://biblioteca.sena.edu.co/exlibris/aleph/u21_1/alephe/www_f_spa/icon/458
96/Informador62/3/vocabulario9.html
https://mx.answers.yahoo.com/question/index?qid=20120813154900AABfp0k
Burriel Mart, F., Lucena conde, F., Arribas Jimeno, S., & Hernndez Mndez, J. Qumica
analtica cualitativa. Madrid: Paraninfo.1998.

Prctica 2 Cromatografa en capa fina

Resultados y Discusiones
1.1 Preparativos para la prctica
En esta primera parte de la prctica, los docentes encargados realizaron la elaboracin de
la fase mvil a partir de los eluyentes disponibles, siendo en este caso Cloroformo y
Metanol, ambos en proporcin 9:1 (9 veces ms volumen de cloroformo que de metanol),
respectivamente.
http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_en_capa_fina
https://mx.answers.yahoo.com/question/index?qid=20080217111806AA2ykL8
http://www.academia.edu/7093683/Laboratorio_alcaloides
https://www.google.com.mx/url?
sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=2&ved=0CCIQFjAB&url=http%3A%2F
%2Ftx.technion.ac.il%2F~sbeer%2Fpublications
%2FMetodo.doc&ei=TBE7VbelGMSHsAXQsIGQCA&usg=AFQjCNHXFpRo1236bXAmU3
w34zIYhSo1bA&sig2=2Gl8AlEhR-a8wQt_bCBltQ
https://www.google.com.mx/search?
newwindow=1&rlz=1C1PRFC_enMX571MX571&es_sm=93&q=cloroformometanol+9%3A1+capa+fina&oq=cloroformometanol+9%3A1+capa+fina&gs_l=serp.3...7045.9491.0.9851.10.10.0.0.0.0.159.908.6j3.9.
0.msedr...0...1c.1.64.serp..10.0.0.I4JCBxf4whg