EQUIPO 5

PRCTICA NO. 11
SEPARACIN DE UN PRODUCTO
DESTILACIN DE VAPOR

NATURAL

POR

INTRODUCCIN
La cafena, tambin denominada tena, guaranina o matena, es un compuesto natural presente en ms de 60
especies de plantas, la encontramos en la industria en el caf, t, bebidas de cola y chocolate principalmente. Es
considerada por algunos como una de las drogas ms extensamente consumidas y aceptadas socialmente en el
mundo, otros la consideran como frmaco o nutriente, pues sus principales efectos son psicoestimulantes,
respiratorios (Su principal uso teraputico es como broncodilatador en patologa respiratoria), msculoesquelticos y cardiovasculares. Al actuar en el SNC puede causar un sndrome de abstinencia al cesar su
consumo y en ocasiones trastornos por uso de sustancias, sus efectos pueden ser peligrosos, causando
intoxicaciones (pues al ser metabolizada puede interaccionar con varios frmacos), e incluso la muerte
dependiendo del metabolismo, salud y consumo de cada persona.

OBJETIVO GENERAL
Extraer cafena de los productos que consumimos a diario y observar su presencia mediante cromatografa de
capa fina.

OBJETIVOS ESPECFICOS

Aprender utilizar el mtodo de la cromatografa

Separar la solucin o mezcla que contenga a la cafena por medio de un disolvente orgnico inmiscible
con el agua.
Identificar en cul de las capas se encuentra la cafena.

MARCO TEORICO
La cafena (C8H10N4O2) (1, 3,7-trimetilxantina) es un compuesto con propiedades
estimulantes, de amplio uso en la industria de las bebidas. Es un componente de los frutos de
la planta de caf, el t, el mate y las bayas de guaran, la nuez de cola y el chocolate
participando en el sabor amargo de estos productos. Se sabe que la cafena es un componente
qumico de alrededor de 60 plantas que lo emplean como pesticida natural, que paraliza e
incluso mata a cierta clase de insectos. Es un producto del metabolismo secundario por lo que
se le considera que no es esencial para las plantas y es almacenada en vacuolas pues es
potencialmente toxico para las clulas de las plantas y adictivo para los seres humanos. La
cafena fue aislada por primera vez por Friese de las semillas de Genipa americana y por
Sthenhouse de los granos de caf. El contenido de cafena de las hojas de t (2-3%) es mayor
que el de los granos de caf (0.7-2%), pero los productos finales listos para beber contienen
una cantidad aproximadamente igual.
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Su solubilidad en agua se incrementa por la presencia de cidos orgnicos o sus sales alcalinas, como
benzoatos, salicilatos y cinamatos.
Es una base dbil, por lo tanto no forma sales estables. Es un alcaloide del grupo de las xantinas. Las
xantinas son un grupo qumico de bases purnicas que incluyen sustancias endgenas (que produce el
cuerpo humano) tan importantes como la guanina y la adenina. A este grupo tambin pertenecen la
teofilina del t, la teobromina presente en el chocolate. La cafena tambin se encuentra en el guaran y
el mate, por lo cual tambin se le ha llamado guaranina y matena respectivamente, siendo
qumicamente idnticos.

ILUSTRACIN 1.
Estructura qumica de algunas xantinas.

Se encuentra en bebidas refrescantes como los refrescos de cola, de los que tambin es posible llevar a
cabo su extraccin, puesto que el resto de componentes son solubles en agua. La cafena en estos
refrescos se encuentra en una proporcin de unos 0.1 mg/ml, unas seis veces menor que en el caf.
Procede de las nueces de cola. De hecho, la cola es una bebida basada en el extracto de nuez de cola
que se puede adquirir en forma de jarabe. Si a este jarabe se le aade cido fosfrico, caramelo, agua y
dixido de carbono tenemos la clsica bebida conocida como Coca-Cola.
El consumo de cafena tiene efectos estimulantes sobre el sistema nervioso autnomo, estimulando la
resistencia al cansancio; y produce efectos miocrdicos y diurticos, as como el relajamiento del
pequeo msculo de los bronquios; se trata de un diurtico menos potente que la teobromina. Sus
efectos sobre el organismo son nocivos, causando insomnio, crisis de ansiedad, temblores, entre otros,
adems de causar adiccin.

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TABLA 1.
Contenido de cafena en algunas
bebidas comerciales

(Franco, 2000)
La cafena puede aislarse del t o el
caf por ebullicin con agua en presencia de cal u xido de magnesio para precipitar los taninos.
Los granos de caf se descafenan antes del tostado, cuando el grano an est verde, porque es all
donde el proceso perjudica menos los sabores. El caf descafeinado no est totalmente exento de
cafena y ste puede contener un residuo de cafena de un 0,1%, y un extracto de caf de 0,3%
Para extraer la cafena de los granos de caf se utilizan varios mtodos:
+ Mtodo de contacto directo
En el contacto directo, los granos se ponen en contacto con agentes descafeinantes, como cloruro de
metileno, despus de ser suavizados con agua o vapor. La cafena se extrae directamente sumergiendo
los materiales en el cloruro.
+ Mtodo de contacto indirecto
Por este procedimiento, se usa una solucin de caf y agua para extraer la cafena. La solucin
conteniendo la cafena se trata luego con un agente descafeinante como acetato etlico, y se mezcla de
nuevo con los granos para que reabsorban su sabor.
A veces este mtodo se denomina descafeinado natural porque el acetato etlico es un compuesto
qumico que se encuentra naturalmente en muchas frutas.
+ Procesamiento del agua
Este procedimiento es similar al mtodo indirecto, excepto que no se usan qumicos. Los granos de caf
se sumergen en agua caliente, luego la solucin se pasa a travs de un filtro de carbn para quitar la
cafena.

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+ Proceso suizo del agua

En este mtodo, la cafena se extrae tambin con filtros de carbn pero los granos se sumergen en agua
caliente saturada con sabor a caf. El resultado es la extraccin de la cafena sin quitar los sabores del
caf.
Se le llama proceso suizo del agua porque originariamente lo desarroll y patent una compaa suiza.
+ Proceso del dixido de carbono
Con este mtodo los granos se sumergen con materiales ablandados al agua, en dixido de carbono
altamente comprimido. Las molculas de cafena se extraen de los granos permitiendo las molculas de
sabor, que son ms grandes, permanecer inalteradas. Este mtodo retiene mejor los sabores del caf que
todos los anteriores.

A continuacin se presentan algunos mtodos de aislamiento de la cafena a partir de productos que

consumimos a diario:

+ AISLAMIENTO DE LA CAFENA DE HOJAS DE T

Se inicia haciendo una infusin metiendo la bolsita en agua hirviendo. Posteriormente, tras una
filtracin por gravedad, todos los materiales slidos quedan descartados, y el filtrado se somete a
ebullicin para disminuir su volumen (y concentrar la cafena).
Agitando el filtrado en contacto con un cierto volumen de diclorometano, la cafena pasa
mayoritariamente a la fase orgnica. Esta extraccin lquido-lquido se lleva a cabo en un embudo de
decantacin. Dado que el diclorometano es ms denso que el agua, formar la capa inferior, que se
podr recoger separada simplemente abriendo la llave del embudo.
Este proceso de extraccin se repite aadiendo a la capa acuosa, todava en el embudo, una nueva
porcin de diclorometano. Esta segunda disolucin de cafena en diclorometano se aade a la primera.
Tras haber estado en contacto con agua, la disolucin de diclorometano debe secarse a fin de retirar las
ltimas trazas de humedad. Aunque el diclorometano apenas disuelve agua, puede retener alguna en
forma de una finsima emulsin. Para eliminarla se puede emplear una sal inorgnica anhidra que se
convertir en sal hidratada. En este caso se usar sulfato de sodio anhidro que atrapa el agua
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convirtindose en Na2SO410 H2O. Ntese que esta sal, debido a su naturaleza inica, no es soluble en
disolventes orgnicos.
Una vez filtrado para separar el desecante, el diclorometano se evapora y queda la cafena como
residuo slido.
(Franco, 2000)
+ AISLAMIENTO DE LA CAFENA DE REFRESCO DE COLA
En un vaso de precipitado de 250 ml, se colocan 10 g de hojas de t molidas en 2.5 g de carbonato de
sodio y 50 ml de agua. La mezcla es calentada hasta ebullicin por 20 minutos, agregando
ocasionalmente ms agua para mantener constante el volumen de la mezcla. La disolucin caliente se
filtra y neutraliza mediante la adicin de una disolucin de cido sulfrico al 10%.
La disolucin neutra es entonces filtrada en un tamiz de celita (la cual se coloca en un embudo Buchner
con papel filtro) y lavada con 10 ml de diclorometano. El filtrado de dos fases se lleva a un embudo de
separacin. La fase orgnica es separada y la acuosa extrada dos veces con porciones de 20 ml de
diclorometano cada una. Las tres extracciones de diclorometano se combinan y el disolvente se
evapora. La cafena cruda se puede recristalizar en la menor cantidad de acetona o agua caliente.
Si se dispone de un dedo fro es posible obtener cristales muy puros de cafena por sublimacin. Los
cristales de la cafena tienen forma en agujas (de 0.25 g aproximadamente) y tienen un punto de fusin
de 235C.
(Gennaro, 2003)

+ AISLAMIENTO DE LA CAFENA DEL CAF

La noche anterior a la realizacin de esta tcnica se prepara una disolucin de caf y se almacena en un
recipiente que tenga cierre hermtico dentro de una nevera.
Para iniciar se miden 100 cm3 de caf y se depositan en el vaso de precipitados de 250 cm3. Limpiar la
probeta y secarla muy bien con papel de filtro. Posteriormente se mide 1 g de carbonato de sodio y se
deposita en el vaso de precipitados con el caf y con la ayuda del agitador se disuelve todo el
carbonato. Con la ayuda del embudo cnico traspasar todo el caf al embudo de decantacin, cuidando
que la llave del mismo est cerrada. Limpiar y secar bien el vaso que utilizaremos en una etapa
posterior. Se miden con la probeta 15 cm3 de triclorometano y se depositan dentro del embudo de
decantacin. Observar cmo se forman dos capas. Agitar suavemente la mezcla que est dentro del
embudo, intentando que las dos capas se mezclen lo mejor posible. Dejar reposar la mezcla hasta que
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vuelvan a aparecer ntidamente las dos capas. Se aaden entonces otros 10 cm3 de triclorometano,
repitiendo los pasos anteriores. En el vaso de 250 cm3 depositar una fina capa de sulfato de magnesio
anhidro. Colocarlo debajo del embudo de decantacin y abrir suavemente la llave para separar la capa
inferior. Cerrar la llave justo en la superficie de separacin; tirar el resto por el desage y limpiar bien
el embudo de decantacin. Preparar un filtro, colocarlo en el embudo cnico y ste sobre el aro y filtrar
el contenido del vaso de 250 cm3. No olvidando colocar debajo del embudo el vaso de precipitados de
100 cm3. Llevar el lquido recogido al equipo de destilacin para recuperar el triclorometano utilizado.
Finalmente depositar todas las porciones del destilado dentro de un cristalizador y observar los cristales
de cafena que se distinguirn al da siguiente.
(Qumica, 2015)
+ CROMATOGRAFA EN CAPA FINA
La cromatografa en capa fina (Thin Layer Chromatography, TLC) es una tcnica de anlisis de
mezclas muy verstil, fcil de emplear y econmica de uso en el laboratorio. Consta de un sistema de
dos fases, una slida (fase estacionaria) que se aplica en forma de capa delgada, absorbente, usualmente
entre 0.1 a 0.25mm de grueso para fines analticos y en los casos que se desea aislar un compuesto el
grosor puede variar entre 0.5-2 mm. Esta capa es fijada a una placa o lmina firme de vidrio, aluminio
o plstico que acta como soporte. A travs de la fase estacionaria transita un lquido o un solvente
(fase mvil o eluente).

ILUSTRACIN 2.
Montaje tpico para cromatografa en
capa fina.

(Franco, 2000)

MATERIALES Y REACTIVOS
+MATERIALES
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Plato caliente
5 vasos de precipitado
2 viales.
Algodn
1 condensador.
1 matraz baln
2 pipetas
1 perilla de tres vas
3 pipetas Pasteur.
2 esptulas.
Embudo de decantacin.
2 vidrio de reloj.

+REACTIVOS
HOJA DE SEGURIDAD
REACTIVO
FRMULA
INCENDIO

Acetato de plomo

Cloroformo

C4H8O6Pb2

CHCl3

No se considera como una

sustancia inflamable

A pesar de ser un producto no

inflamable, los contenedores
donde se encuentra almacenado el
cloroformo explotan con calor.

REACTIVIDAD

Estable bajo las condiciones de

manipulacin y almacenamiento
recomendadas. Mantener alejado
de agentes oxidantes y de
materiales fuertemente alcalinos o
cidos, a fin de evitar reacciones
exotrmicas

EXPOSICIN

Tos, dolor de garganta, asfixia.

Inflamacin de los bronquios.
Destruccin de las mucosas
nasales y de las vas respiratorias
Enrojecimiento, dolor.
Conjuntivitis (inflamacin
temporal de la conjuntiva). Visin
borrosa. En casos extremos
ceguera permanente.
Enrojecimiento, dolor.
Resequedad de la piel, dermatitis
y alergias. Calambres
abdominales, estreimiento,
convulsiones, dolor de cabeza,
nuseas, vmitos

Reacciona violentamente con:

-Acetona en medios muy bsicos.
-Fluor, tetrxido de dinitrgeno,
metales como aluminio,
magnesio, sodio, litio y potasio,
sodio en metanol, metxido de
sodio, nitrometano,
isopropilfosfina y derivados
alquilados de aluminio.
Su poder como anestsico se
presenta a concentraciones entre
10000 y 15000 ppm, mientras que
entre 15000 y 18000 puede ser
fatal por paro respiratorio.
Contacto con ojos: Ocasiona
conjuntivitis, e, incluso,
quemaduras dolorosas, ya sea en
forma de vapor o lquido.
Contacto con la piel: No hay una
absorcin significativa a travs de
la piel. Ingestin: Provoca
nusea, vmito, salivacin,
anorexia, irritacin
gastrointestinal y dao a hgado.

NaOH
NaOH

CAFEINA
C8H10N4O2

SILIC
SO2

Este compuesto no es inflamable sin

embargo, puede provocar fuego con
materiales combustibles. Por otra parte,
se generan gases inflamables al ponerse
en contacto con algunos metales..
Se ha informado de reacciones
explosivas entre el hidrxido de sodio y
nitrato de plata amoniacal caliente, 4cloro-2-metil-fenol, 2-nitro anisol, cinc
metlico,. Con bromo, cloroformo y
triclorometano las reacciones son
vigorosas o violentas. La reaccin con
sosa y tricloroetileno es peligrosa.

Productos de combustin peligrosos:

Productos de descomposicin peligrosos
formados en condiciones de incendio,
oxido de carbono, xidos de nitrgeno.

Incom

El producto es estable si se tienen en

consideracin las normas/indicaciones
sobre almacenamiento y manipulacin.
Susceptible de explosin por formacin
de polvo.

Mater
Halog
hidrg
haloge
ligero
hexafl
xenn

El hidrxido de sodio es irritante y

corrosivo de los tejidos. Los casos ms
comunes de accidente son por contacto
con la piel y ojos, as como inhalacin
de neblinas o polvo. Inhalacin: La
inhalacin de polvo o neblina causa
irritacin y dao del tracto respiratorio.
En caso de exposicin a
concentraciones altas, se presenta
ulceracin nasal

Ingestin: Txico si se ingiere. Nunca

debe administrarse nada por la boca a
una persona inconsciente. Enjuague la
boca con agua y consulte a su mdico.
Inhalacin: Puede ser nocivo si se
inhala. Puede provocar una irritacin en
el tracto respiratorio. Si se aspir,
mueva a la persona al aire fresco, si ha
parado de respirar aplicar respiracin
artificial. Contacto con la piel: Puede
ser nocivo si es absorbido por la piel,
puede causar irritacin en la piel.
Eliminar lavando con mucho jabn y
abundante agua. Contacto con ojos:
Provoca irritacin ocular.

Se trat
fisiol
inactiv
muest
peligr
ingest
contac
Tampo
inhala
partcu
mantie
previs
cidos

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ELIMINACIN
DE
RESIDUOS

Su tratamiento y eliminacin de la
legislacin interna de cada pas.

En pequeas cantidades puede

dejarse evaporar en una campana
extractora.

CARACTERSTICAS

Polvo cristalino
Color : Blanco
Olor : Inodoro
(PUJ, s.f.)

El cloroformo es un lquido
incoloro con olor dulce
caracterstico, muy voltil.
(UNAM, s.f.)

FUENTES

Para pequeas cantidades, agregar

lentamente y con agitacin, agua y
hielo. Ajustar el pH a neutro con HCl
diluido. La disolucin acuosa
resultante, puede tirarse al drenaje
diluyndola.
Es un slido blanco e industrialmente se
utiliza como disolucin al 50 % por su
facilidad de manejo
(INR, 2005)

Desechar en contenedor de sustancias

orgnicas.

Recog
proced
elimin
residu

Polvo blanco indoloro

Solido

(BASF, 2015)

(Faga

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CUESTIONARIO
1. Para qu se utilizan los mtodos cromatogrficos y en qu consisten cada uno de ellos?
R= Se utilizan para el anlisis cuantitativo de las sustancias "puras" en la separacin de mezclas, los
tipos o mtodos son:
+ CROMATOGRAFA EN COLUMNA:
Cromatografa de intercambio inico: se basa en la afinidad de iones en la solucin por los
sitios de polaridad opuesta presentes en la fase estacionaria.
Cromatografa de exclusin: est basada en la habilidad de los materiales de porosidad
controlada para separar componentes de una mezcla por su tamao y forma molecular.

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Cromatografa de afinidad: tiene su base en la especificidad de macromolculas biolgicas, que

se unen en la fase estacionaria, separndolas al variar el pH.
Cromatografa de adsorcin: se fundamenta en las diferencias de afinidad relativa de los
compuestos por el slido usado como fase estacionaria. Estas separaciones se determinan por
interacciones polares (casi siempre la fase estacionaria es ms polar que la fase mvil).
Cromatografa de particin: la fase estacionaria se encuentra en estado lquido o fase acuosa y
est soportada en un slido inerte, la fase mvil puede ser un lquido (cromatografa de
particin lquido-lquido) o un gas (cromatografa de particin gas-lquido). La cromatografa
en papel es del tipo particin en la que la fase estacionaria es una capa de agua adsorbida en una
hoja de papel.
Cromatografa de fase reversa: depende de interacciones hidrofbicas entre las molculas del
soluto en la fase mvil y el ligando hidrofbico inmovilizado en la fase estacionaria, estas
condiciones asumen la interaccin de unin como resultado de un efecto entrpico favorable,
como son acuosas, indica un alto grado de estructuras de agua organizadas alrededor del soluto
y el ligando inmovilizado, a medida que el soluto se une al ligando hidrofbico disminuye el
rea hidrofbica expuesta hacia el disolvente.

+ CROMATOGRAFA PLANA:
Cromatografa en capa fina (TLC): la fase estacionaria es una capa de partculas de unos mm de
espesor, estn fijadas sobre un soporte slido (Al, plstico, o vidrio). Despus de aplicar el
analito cerca de la parte inferior de la placa seca, el disolvente produce la separacin.
Cromatografa en papel: el soporte y fase estacionaria es papel de celulosa, la cual es muy polar
en el agua y se vuelve electronegativa. El papel tiene propiedades de intercambio inico,
dbiles, as como de adsorcin.
(Hahn, 2000) (Zieloff, 1993)

2. Quin desarroll estos mtodos?

R= El principio de la cromatografa como es usada en la actualidad fue descubierta por el botnico
Michael Tswett (1872-1919). En 1906 public un procedimiento relativo a la separacin y aislamiento
de pigmentos verdes y amarillos por absorcin.
(Zieloff, 1993)

3. Cmo se logra la cromatografa por adsorcin?

R= Se basa principalmente en las diferencias que hay en la afinidad relativa de los compuestos por el
slido utilizado como fase estacionaria. L as separaciones obtenidas se determinan prcticamente por
interacciones polares, siendo la fase estacionaria ms polar que la mvil
(Brunton, 2006)
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4. En cromatografa, Cundo se dice que un compuesto es polar?

R= Cuando ste es soluble en agua o es hidroflico.
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