Amilasa Practica

DETERMINACION DE AMILASA
I. INTRODUCCIN:
II. Marco teorico:
La amilasa, producida principalmente en el pncreas exocrino y en las
glndulas salivales, escinde los enlaces -1-4 glucosdicos de los polisacridos
(almidn y glucgeno). Se encuentra elevada en el suero de pacientes con
pancreatitis aguda alcanzando los valores ms elevados entre las 24 y 30
horas posteriores al ataque, declinando luego para volver a los niveles
normales entre las 24 y 48 horas siguientes.
Tambin se ve aumentada en este caso la excrecin urinaria de la enzima,
persistiendo la hiperamilasuria 3 a 5 das, luego de que la actividad srica ha
alcanzado los niveles normales. Tambin es posible encontrar valores
aumentados en cualquier caso de "abdomen agudo" o intervencin quirrgica
en regiones prximas al pncreas. La parotiditis bacteriana y paperas se
asocian tambin con elevaciones en los niveles de amilasa srica.
La -amilasa es una enzima proteica que se encuentra en la saliva humana y
cataliza la degradacin del almidn, que es un polisacrido de reserva vegetal.
El almidn est formado por dos tipos de molculas: la amilosa y la
amilopectina, ambos polisacridos de glucosa.
La amilosa se conforma por cadenas lineales de glucosas unidas por

enlaces - C1-C4.
Amilopectina tiene, adems de estos ltimos enlaces, uniones C1 con
C6, formando cadenas ramificadas.
VALORES NORMALES
El rango normal es de 23 a 85 unidades por litro (U/L). Algunos laboratorios dan
un rango de 40 a 140 U/L.
Nota: los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre
diferentes laboratorios. Hable con el mdico acerca del significado de los
resultados especficos de su examen.
SIGNIFICADO CLINICO
La medicin de la actividad amilasa en suero y orina tiene utilidad
principalmente para el diagnstico de enfermedades pancreticas como la
pancreatitis crnica o aguda. Se ha comunicado que la sensibilidad y
especificidad diagnstica de la amilasemia en la pancreatitis aguda son del 70
al 98% y del 70 al 76% respectivamente, y para la amilasuria del 80 al 98% y
del 80 al 90%.
La hiperamilasemia tambin puede ser debida a insuficiencia renal, dolor

abdominal agudo, tumor en pulmones u ovarios, lesiones en las glndulas
salivales, macroamilasemia, cetoacidosis diabtica, enfermedad del tracto
biliar, trauma cerebral, alcoholismo crnico y medicamentos (opiceos).
FUNDAMENTOS DEL METODO
La -amilasa hidroliza el sustrato definido 2-cloro-p-nitrofenil- -D-maltotrisido
(CNP-G3) para liberar 2-cloro-p-nitrofenol (CNP), formndose 2-cloro-nitrofenil-D-maltsido (CNPG2), maltotriosa (G3) y glucosa. El CNP absorbe a 405 nm
y la velocidad de aparicin del color es directamente proporcional a la actividad
enzimtica. El uso de este sustrato definido, sustancia de estructura y peso
molecular conocido, posibilita la expresin de los resultados en U/l y no
requiere enzimas auxiliares.
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: viales conteniendo CNP-G3.
B. Reactivo B: buffer MES pH 6; 100 mmol/l.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Reactivo B: listo para usar. Reactivo A; preparacin: reconstituir cada vial con el
volumen de Reactivo B indicado en el rtulo. Tapar y agitar hasta disolucin
completa.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". El Reactivo B contiene
tiocianato de potasio. R20/21/22: nocivo por inhalacin, por ingestin y en
contacto con la piel. Para reducir posibles contaminaciones del reactivo con
amilasa salival, no debe pipetearse con la boca el Reactivo B ni el Reactivo A
reconstituido. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de
trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras
deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.
MUESTRA
Suero, plasma u orina
a) Recoleccin: si se utiliza suero, obtener de la manera usual. Separar el
suero del cogulo lo ms rpidamente posible. En caso de usar plasma ste
debe ser heparinizado. Si se emplea orina, la determinacin puede efectuarse
en una muestra de orina ocasional.
b) Aditivos: en caso de usar plasma, debe utilizarse heparina para su
obtencin. Si se usa orina ver d.
c) Sustancias interferentes conocidas: hemlisis, anticoagulantes (citrato,
oxalato y EDTA). En el caso de orina no debe agregarse cido clorhdrico como
conservador. No se observan interferencias por bilirrubina hasta 200 mg/l,
hemoglobina hasta 0,5 g/dl y triglicridos hasta 13 g/l. Referirse a la bibliografa

de Young para los efectos de las drogas en el presente mtodo.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: en suero la amilasa es
estable durante una semana a temperatura ambiente (si se evita la
contaminacin bacteriana) o varios meses refrigerada. En orina, si la muestra
no se procesa en el da, es conveniente ajustar el pH aproximadamente a 7
(con hidrxido de sodio) dado que el pH cido inactiva la enzima
irreversiblemente. A pH 7 puede conservarse refrigerada por lo menos 10 das
sin prdida de actividad, si no existe contaminacin bacteriana.
VALORACIN DE RESULTADOS ANORMALES

Los niveles aumentados de Amilasa en la sangre pueden indicar:
Cncer de pncreas, ovarios, pulmn.
Colecistitis.
Clico de vescula biliar.
Embarazo ectpico con rotura de trompas.
Obstruccin intestinal.
Pancreatitis aguda.
Problemas de obstruccin de conductos biliares o pancreticos.
Ulcera de estmago perforada.
Los niveles disminuidos de Amilasa en la sangre pueden indicar:
Cncer de pncreas.
Lesin pancretica.
Enfermedades renales.
Toxemia en el embarazo.
III.
Materiales:
AMILOKIT (A Y B)
CENTRIFUGA
Pipeta de 5%
Alcohol
Tubo de Ensayo
Agujas
Pipeta Electronica
Ligadura
Algodn
Tubo control
0.311
IV.
V.
Tubo
desconocido
0.250
PROCEDIMIENTO:
RESULTADO:
Formula :
Amilasa =
C D x 1000
C
Amilasa =
0. 311 0.250 x 1000

0.311
Amilasa =
196
El valor obtenido de amilasa fue 196, el cual nos indica que el resultado
est dentro de los valores normales.
VI.
CONCLUSIN:
Segn el cuadro de valores de referencia y nuestros resultados obtenidos que

fue 196 (UA/dl), llegamos a la conclusin que la muestra (amilasa) est dentro
de los valores normales en el suero, aunque tenemos que hacer referencia que
los valores no son exactos ya que habido una cierta variacin por las
cantidades de agua, pero aun as nuestros valores obtenidos estn dentro de lo
normal.
CONDICIN CLNICA
Normal
Pancreatitis aguda
SUERO
< 120
300 a 1200
RECOMENDACIONES:
Debe
saliva,
en la
que la
Tener
evitarse contaminaciones con

ya que la actividad de amilasa
saliva es 700 veces mayor
del suero.
cuidado en el proceso de
manipulacin ya que esto
variar nuestros resultados.
podra
VII.
DISCUSIN:
La concentracin srica de amilasa se usa de forma generalizada como

prueba de deteccin sistemtica para la pancreatitis aguda en el
paciente con dolor abdominal agudo o el dolor de espalda.
Aproximadamente, el 85% de los pacientes con pancreatitis aguda

presentan un aumento de la amilasa srica. La amilasa srica suele
aumentar en la primeras 24hs del proceso y permanece elevada
durante 1 a 3 das. Las cifras retornan a la normalidad en 3 a 5 das,
salvo en el caso que exista necrosis pancretica extensa, obstruccin
incompleta de los conductos o formacin de pseudoquistes. Por este
motivo su sensibilidad cae a valores del 30% a partirde las 48hs de

inicio del dolor abdominal.(5)
Un valor mayor a 65UI/L har cuestionable una pancreatitis

aguda; una concentracin mayor a 130UI/L hace ms probable el
diagnstico y valores 3 veces mayores de lo normal lo establecen,
siempre que se haya excluido otros procesos que elevan la amilasa.
Adems del pncreas son varios los rganos capaces de producir
amilasa: las glndulas salivales, las trompas de Falopio, los ovarios, el
intestino delgado, el pulmn, la prstata y el hgado. Sin embargo en
la prctica, y en condiciones normales, solo el pncreas y las
glndulas
salivales
contribuyen
en
forma significativa
al
mantenimiento de los niveles sricos de esta enzima. Los valores de
la amilasa en suero son de utilidad solo para el diagnstico, no
guardan correlacin con la severidad del cuadro, por lo tanto no
tienen valor pronstico.(5-7)
Su sensibilidad es del 83% , su especificidad del 88% y su valor
predictivo positivo del 65%.(5)
La siguiente tabla muestra los trastornos que pueden generar
falsos positivos en esta prueba.
ENFERMEDADES
PANCREATICAS
Pancreatitis
crnica
Traumatismo
pancretico
Cncer
de
pncreas
TRANSTORNOS
PANCREATICOS
NO OTROS
TRANSTORNOS
ABDOMINALES
Insuficiencia renal
Colecistitis
Lesin
de
las
Litiasis
del
glndulas salivales
coldoco
Ca.
de
pulmn,
lcera
esfago,
mama,
perforada
ovario
Infarto
Macroamilasmia
intestinal
Quemaduras
Peritonitis
Embarazo
Aneurisma
Traumatismo
artico
cerebral
Hepatopata
crnica
Apendicitis
aguda
Obstruccin
intestinal
Las siguientes son situaciones que pueden generar falsos

negativos:
a) Si se retrasa (de 2 a 5 das) la obtencin de la muestra de
sangre.
b) Si el trastorno subyacente es una pancreatitis crnica en vez de
una pancreatitis aguda.
c) Presencia de hipertrigliceridemia.
REFERECIA BIBLIOGRFICA:
1)
https://es.scribd.com/doc/13590657/QUIMICA-CLINICAAMILASA
2)
http://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum
%20espanol/amilasa405aa_liquida_sp.pdf
3)
https://www.tuotromedico.com/temas/amilasa_en_suero.
htm
4)
http://med.unne.edu.ar/revista/revista158/4_158.htm
5)
http://www.spinreact.com.mx/public/instructivo/QUIMICA
%20CLINICA/LIQUIDOS/41201.02%20AMILASA-LQ
%202011.pdf

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DETERMINACION DE AMILASA

La amilosa se conforma por cadenas lineales de glucosas unidas por

La hiperamilasemia tambin puede ser debida a insuficiencia renal, dolor

hemoglobina hasta 0,5 g/dl y triglicridos hasta 13 g/l. Referirse a la bibliografa

VALORACIN DE RESULTADOS ANORMALES

Cncer de pncreas, ovarios, pulmn.

Clico de vescula biliar.

Embarazo ectpico con rotura de trompas.

Problemas de obstruccin de conductos biliares o pancreticos.

Ulcera de estmago perforada.

Los niveles disminuidos de Amilasa en la sangre pueden indicar:

0. 311 0.250 x 1000

Segn el cuadro de valores de referencia y nuestros resultados obtenidos que

evitarse contaminaciones con

La concentracin srica de amilasa se usa de forma generalizada como

Aproximadamente, el 85% de los pacientes con pancreatitis aguda

motivo su sensibilidad cae a valores del 30% a partirde las 48hs de

Un valor mayor a 65UI/L har cuestionable una pancreatitis

Las siguientes son situaciones que pueden generar falsos

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