UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLAN

INFORME EXPERIMENTAL :
LABORATORIO DE CIENCIAS EXPERIMENTALES

BIOQUIMICA DIAGNOSTICA

GRUPO: 2201

EQUIPO No.:

Carbajal
Cruz Santiago Stefanny Guadalupe
Espinosa Cruz Valeria

PROFESORA: Ana Myriam Rivas Salgado

FECHA DE ENTREGA: 18 de mayo de 2015

INTRODUCCIN
1. Titulacin
La titulacin es una de las tcnicas ms comunes en la qumica analtica para
la determinacin de la concentracin de sustancias en solucin. El
conocimiento de esta tcnica es esencial en el laboratorio qumico. Dada una
solucin cida, puede determinarse su concentracin conociendo el volumen
requerido para neutralizarla con una solucin bsica de concentracin
conocida (titulacin cido-base). Para reconocer el punto final de la titulacin
se puede utilizar un indicador que cambie de color al pasar de una solucin
bsica a una cida o a la inversa. Un ejemplo es la fenolftalena, que pasa de
color rosa en medio bsico a incolora en medio cido. En el punto de viraje,
llamado "punto final", se considera que el nmero de moles de cido
monoprtico y de base monohidroxlica que han reaccionado es el mismo.
Midiendo los volmenes de ambas y conociendo la concentracin de una de
ellas, se puede conocer la concentracin de la otra.
2. Uso correcto de la bureta.
Las buretas deben estar perfectamente limpias para que las mediciones de
volmenes sean reproducibles en todas las titulaciones. Si es necesario
engrasar la llave, deber usarse la menor cantidad posible de grasa o vaselina
para lubricarla. Si la llave es de tefln debe extraerse y limpiarse
perfectamente, tanto la llave como la superficie de vidrio, eliminando las
partculas de polvo que podran rayar la superficie de tefln al girar la llave. Al
insertar la llave debe obtenerse un ajuste correcto, ya que si queda demasiado
floja puede haber prdidas. La bureta debe estar limpia. Lavarla con pequeas
porciones de solucin titulante antes de llenarla, descartando cada vez la
solucin en un vaso. Utilizar un embudo apropiado y verificar antes de los
lavados o el llenado que la llave est cerrada. Finalmente, llenar la bureta con
solucin titulante hasta sobrepasar el enrase. Colocar un recipiente bajo la
bureta y abrir la llave por completo permitiendo que el lquido fluya
rpidamente. Con esto se logra que la porcin debajo de la llave se llene
completamente, sin que queden burbujas de aire atrapadas. Cuando esto se
logra, cerrar rpidamente la llave y enrasar en cero mL de la forma que se
indica en el Trabajo Prctico No. 0. Al terminar de usarla, la bureta debe
lavarse y enjuagarse con agua corriente y luego con agua destilada. En el caso
de emplear soluciones alcalinas, quite la llave para asegurar su limpieza.
3. Cmo actan los indicadores Los indicadores cido-base:
Estos son compuestos orgnicos que presentan la particularidad de variar su
color dependiendo de la concentracin de protones o pH de la solucin. Para
determinar el pH se observa el color que toman en la solucin distintos
indicadores. Conociendo el rango en que vira cada indicador es posible ubicar
el pH de la solucin entre dos valores prximos

MARCO TERICO

Acidos y bases

En los tiempos de Arrhenius se reconoca a los cidos en forma general como

sustancias que, en solucin acuosa.
* Tienen un sabor agrio si se diluyen los suficiente para poderse probar.
* Hacen que el papel tornasol cambie de azul a rojo.
* Reaccionan con los compuestos llamados bases (contienen iones hidrxido, OHformando agua y compuestos llamados sales. La sal que se forma est compuesta
por el ion metlico
Arrhenius y otros cientficos reconocan en trminos generales que las bases
(tambin llamadas lcalis) son sustancias que, en solucin acuosa.
* Tienen un sabor amargo.
* Se sienten resbalosas o jabonosas al tacto.
* Hacen que el papel tornasol cambie de rojo a azul.
* Reaccionan con lo cidos formando agua y sales.
Las definiciones de Bronsted - Lorwy son,
* Un cido de Bronsted - Lowry es un donador de protones, pues dona un ion
hidrgeno, H+
* Una base Bronsted - Lorwy es un receptor de protones, pues acepta un ion
hidrgeno, HEl cambio de color del indicador se denomina viraje, y el intervalo de pH en el que
se produce el cambio de color, es lo que se denomina intervalo de viraje. Cada
indicador acido- base presenta diferente intervalo de viraje, a continuacin se
muestran algunos:

Normalidad
La concentracin normal o normalidad se define como el nmero de equivalentes
de soluto por litro de disolucin

N= (# equivalente de sustancia)/ (litro de disolucin)

El peso equivalente en un cido se define como la masa en gramos que producir
1 mol de iones H+ en una reaccin, mientras que en una base se refiere a los
iones -OH

Equivalente (g)= (MM)/ (# de partculas intercambiadas)

donde:
MM: Masa molecular o peso frmula en gramos
# particulas intercambiadas: en cidos (H+), en bases ( -OH) y en reacciones
redox ( electrones)
Titulacin
La titulacin es una tcnica de anlisis cuantitativo que permite conocer la
concentracin desconocida de una disolucin de una sustancia a partir de la
neutralizacin de esta con una sustancia de la cual se conoce su concentracin.
Para este mtodo se utiliza un patrn primario.
Patrn primario
Son sustancias patrones para la estandarizacin de cidos y bases. Un patrn
primario tambien llamado estndar es una preparacin que contiene una
concentracin conocida de un elemento o sustancia especfica.
Usualmente son slidos que cumplen con las siguientes caractersticas:

Tienen composicin conocida: Es decir se conoce la estructura y

elementos que lo componen.
Deben tener elevada pureza: Para una correcta estandarizacin se debe
utilizar un patrn que tenga la mnima cantidad de impurezas que puedan
interferir con la titulacin.
Debe ser estable a temperatura ambiente: No se pueden utilizar
sustancias que cambien su composicin por efecto del ambiente.
Debe soportar temperaturas altas: Debe soportar temperaturas altas para
su secado en la estufa. Normalmente debe ser estable a temperaturas
mayores que las del punto de ebullicin del agua.
No debe absorber gases
Debe reaccionar rpida y estequimetricamente con el titulante.
En muchas ocasiones es necesario conocer la concentracin de soluto en una
solucin y para poder determinarla se han desarrollado varios mtodos analticos.
Uno de los ms utilizados, por su sencillez y rapidez, es la titulacin o
neutralizacin de cidos y bases. sta se puede llevar a cabo con el uso de
indicadores coloridos o bien mediante el uso de un potencimetro. El mtodo
aprovecha las reacciones equivalentes.

Y para poder conocer la concentracin

utilizaremos la siguiente formula
(N1)(V1)=(N2)(V2)
Dnde:
N1=concentracin de la solucin valorada
V1=volumen empleado de la solucin valorada
N2=Concentracin de la solucin problema
V2=volumen empleado de la solucin problema
EXPERIMENTACIN 1. INTERVALO DE VIRE
Problema de estudio
Determinar experimentalmente el intervalo de vire de indicadores cido-base en la
escala de pH
Hiptesis
El intervalo de vire de un indicador cido-base est en funcin del tipo de indicador
que se usa
Procedimiento experimental
1.- Enumerar del 0 al 14 los tubos de ensayo
2.-Colocar en el tubo de ensayo No. 0, 1 ml de solucin HCl (1M).
3.- En el tubo de ensayo nmero 1 se colocar 1 ml de solucin HCl (1 M) y agregar
9 ml de agua destilada.
4.- Del tubo de ensayo nmero 1 se extraer 1 ml de solucin y colocar en el tubo
de ensayo nmero 2. Agregar 9 ml de agua destilada a este tubo.
5.- Del tubo de ensayo nmero 2 se extraer 1 ml de solucin y colocar en el tubo
de ensayo nmero 3. Agregamos 9 ml de agua destilada a este tubo.
6.- Del tubo de ensayo nmero 3 se extraer 1 ml de solucin y colocar en el tubo
de ensayo nmero 4. Agregamos 9 ml de agua destilada a este tubo.
7.- Del tubo de ensayo nmero 4 se extraer 1 ml de solucin y se colocar en el
tubo de ensayo nmero 5. Agregamos 9 ml de agua destilada a este tubo.
8.- Del tubo de ensayo nmero 5 se extraer 1 ml de solucin y se coloc en el tubo
de ensayo nmero 6. Agregamos 9 ml de agua destilada a este tubo.
9.- En el tubo de ensayo nmero 7 se agregaron 10 ml de agua destilada.
10.- En el tubo de ensayo nmero 14 se colocar 1 ml de solucin NaOH (1M).
11.- En el tubo de ensayo nmero 13 se colocar 1ml de solucin NaOH (1 M) y

agregar 9 ml de agua destilada.

12.- Del tubo de ensayo nmero 13 se extrajo 1 ml de solucin y colocar en el tubo
de ensayo nmero 12. Agregar 9 ml de agua destilada a este tubo.
13.- Del tubo de ensayo nmero 12 se extrajo 1 ml de solucin y colocar en el tubo
de ensayo nmero 11. Agregamos 9 ml de agua destilada a este tubo.
14.- Del tubo de ensayo nmero 11 se extrajo 1 ml de solucin y se colocar en el
tubo de ensayo nmero 10. Agregamos 9 ml de agua destilada a este tubo.
15.- Del tubo de ensayo nmero 10 se extrajo 1 ml de solucin y se coloc en el
tubo de ensayo nmero 9. Agregamos 9 ml de agua destilada a este tubo.
16.- Del tubo de ensayo nmero 9 se extrajo 1 ml de solucin y colocar en el tubo
de ensayo nmero 8. Agregamos 9 ml de agua destilada a este tubo.
17.- Una vez preparados todos los tubos de ensayo, tomamos el indicador y
agregamos 1 gota en cada uno de los tubos de ensayo.
18.- Anotar observaciones
Resultados
Tubo de ensayo
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14

Conclusiones

Color
Rojizo
Rojizo
Rojizo
Anaranjado-amarillo
Anaranjado-amarillo
Anaranjado
Anaranjado
Naranja claro
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Amarillo

Pudimos detectar por el simple hecho a que debido a los diferentes tipos de
indicadores de pH, los colores tanto para reactivos como para productos cambia,
como por ejemplo, experimentalmente enumeramos tubos de ensayo del 0 al 14
en donde los primeros siete fungan como cidos, el tubo de ensayo nmero siete
era un neutro, donde solo se encontraba agua destilada y del ocho en adelante
fungan como bases, en nuestra experimentacin el indicador que empleamos
para demostrar esto fue el naranja de metilo, en donde pudimos apreciar que
nuestros cidos tenan un tono entre rojo y las bases se convertan en un color
amarillo.
El intervalo terico que se tiene establecido para el viraje del naranja de metilo es
de 3,2 y 4,4. Sin embargo en nuestra experimentacin pudimos notar que hubo
cambios de color entre los pH 2 y 3.
EXPERIMENTACION 2. NORMALIZACION DE HIDROXIDO DE SODIO
Problema
Preparar una disolucin de NaOH aproximadamente 0.1 N y determinar su
concentracin exacta experimentalmente
Hiptesis
Mediante la neutralizacin de biftalato de potasio con NaOH, podemos
determinar la concentracin de la solucin de NaOH.
Procedimiento
Tratamiento previo del patrn primario
Secar el patrn primario en un pesafiltros y meter a la estufa a 110 C
durante 1 hora. Trancurrido este tipo pasar el pesafiltros a un desecador
para que ste absorba la hmedad y los carbonatos.
Preparacin de 1/2 L NaOH 0.1 N
1 Hervir 1 Litro de agua destilada en un vaso de precipitados durante 10 min
a fin de eliminar el CO2 , dejar enfriar.
2 Colocar en un vaso de precipitados de 250 ml 0.2 g de Hidrxido de sodio
con la mnima cantidad de agua destilada previamente hervida y colocar a
fuego directo hasta disolver completamente.
3 Agregar 1 g de cloruro de bario para precipitar las sales de carbonato.
4 Decantar el precipitado y colocar la disolucin de hidrxido de sodio a un
matraz de 500 ml y aforar con agua destilada.
5 Transferir esta solucin a una botella de plstico perfectamente limpia y
dejar que la solucin repose varios das a fin de que precipite y sedimenten

las sales. Utilizar solo la solucin transparente.

Estandarizacin de NaOH

1 Pesar tres muestras de biftalato de potasio en tres matraces Erlenmeyer

limpios secos y enumerados. Agregar 20 ml de agua destilada hervida y
disolver. Estas cantidades pueden ser diferentes a 0.1 g o no. Lo importante
es conocer perfectamente la cantidad que se esta pesando.
2 Agregar 3 gotas de fenolftalena a cada matraz.
3 Lavar una bureta de 50 ml con un poco de la disolucin de NaOH y colocar
en un soporte universal y sujetar con ayuda de una pinza doble para bureta.
4 Con ayuda de un embudo de vidrio llenar la bureta con NaOH a una medida
perfectamente visible. Leer y anotar la lectura inicial de la bureta.
5 Colocar el matraz Erlenmeyer debajo de la bureta y sin dejar de agitar, abrir
la llave de la bureta con un goteo constante y moderado.
6 Titular la primer concentacin hasta alcanzar el primer tono rosado
permanente, es decir, cuando la reaccin se ha completado y se alcanz el
punto de equivalencia. Conviene colocar una hoja de papel blanco debajo
del matraz para apreciar el cambio de color.
7 Leer de nuevo la bureta y anotar la lectura final.
8 Registrar el volumen de Hidrxido de sodio requerido para la titulacin
9 Titular las dos soluciones de biftalato de potasio restantes de la misma
forma, registrando los volmenes.
10 Calcular la normalidad de NaOH para cada titulacin y promediar.
Resultados
Tabla 1 . Normalizacin de NaOH

Nmero Gramos de
de
Biftalato de
muestra potasio

Volumen de
NaOH gastados
(ml)

Concentracin de
NaOH
( Normalidad N )

0.5038

26.01

0.0945

0.6163

32.9

0.0899

1.033

58.3

0.0866
Promedio: 0.0903 N

Clculo de la Normalidad

Conclusiones
La reaccin entre el biftalato de potasio y el NaOH
C6H4(COOH)COOK + NaOH C6H4(COONa)COOK + H2O
La estandarizacin o normalizacin de la disolucin de NaOH requiri un mayor
grado de exactitud en la determinacin volumetrica, ya que un error afectara la
determinacin de toda la concentracin. Para ello obtuvimos el volumen exacto
donde la reaccin se encontr en su punto de equivalencia y con los datos que se
obtuvieron pudimos calcular los equivalentes y la normalidad en cada una de las
titulaciones, con el cual obtuvimos el valor real de la concentracin del hidrxido
de sodio 0.0903 N.
EXPERIMENTACIN 3. TITULACIN DE HCl
Problema de estudio
Determinar la concentracin de una solucin problema mediante el mtodo de
titulacin por neutralizacin cido-base.
Hiptesis
Mediante la neutralizacin de cido clorhdrico con NaOH, podemos encontrar la
concentracin del cido clorhdrico.
Procedimiento
1.- Ya que en la prctica anterior hicimos la disolucin del NaOH y conocemos su
concentracin, de esta disolucin le agregaremos 15ml a los tres matraces
Erlenmeyer.
1.
2.
3.
4.

Etiquetaremos los matraces del 1 al 3.

Se le agregaran 3 gotas de fenolftalena a cada matraz ya etiquetado.
Colocaremos el soporte universal y la pinza para bureta.
Ajustaremos la bureta en las pinzas para bureta en donde nosotros
podamos ver la escala perfectamente y se pueda colocar el matraz
Erlenmeyer.
5. Con ayuda de un embudo colocaremos el HCl en la bureta hasta donde
podamos ver perfectamente la escala.
6. Colocaremos el matraz Erlenmeyer debajo de la bureta y sin dejar de agitar
abrimos la llave de la bureta teniendo un goteo constante y moderado.
7. Debajo del matraz Erlenmeyer pondremos una hoja blanca, para poder
visualizar el cambio de la disolucin cuando ocurra este cerramos la bureta
y anotamos el volumen gastado de HCl.

Resultados
Tabla 1.- Resultados experimentales del volumen gastado de HCl
Volumen que ocupamos de NaOH
15 ml
15 ml
15 ml

Volumen gastado de HCl

25.9 ml
24.6 ml
20.4 ml
PROMEDIO: 25.7 ml

CONCENTRACION DEL HCl

Utilizaremos el principio de equivalencia para poder saber su concentracin
(N1)(V1)=(N2)(V2)
N1 (0.0257L)=(0.0913N)(0.015L)
N1= (0.013N)(0.015L)/(0.0257L)
N1= 0.0532 N

Conclusiones
Se pudieron cumplir algunos de los objetivos planteados en el diseo experimental
tambin se obtuvieron demasiados errores antes mencionados, aun con estos
errores pudimos realizar la valoracin de la concentracin del cido clorhdrico
claro con ayuda de la concentracin del NaOH que con anterioridad habamos
realizado. Ocupando el principio de equivalencia que ya mencionamos en la
introduccin se obtuvo los resultados que aparecen en esta prctica sea la
concentracin del HCl.
EXPERIMENTACIN 4. TITULACION DE ACIDO ACETICO
Problema de estudio
Determinar la concentracin de cido actico (cido dbil) mediante el mtodo de
titulacin por neutralizacin cido-base, con Hidrxido de sodio (base fuerte).
Hiptesis
Mediante la neutralizacin de cido actico con NaOH, podemos encontrar la
concentracin del cido actico.
Procedimiento
1.- Agregar la disolucin de NaOH en tres matraces Erlenmeyer, en cada uno
poner 10 ml
2.- Etiquetar los matraces del No.1 al No. 3.
3.-Agregar 3 gotas de rojo de metilo a cada matraz ya etiquetado.
4.- Colocar el soporte universal y la pinza para bureta.
5.- Ajustar la bureta en las pinzas para bureta en donde nosotros podamos ver
la escala perfectamente y se pueda colocar el matraz Erlenmeyer.
6.- Con ayuda de un embudo colocaremos el cido actico en la bureta hasta
donde podamos ver perfectamente la escala.
7.- Colocar el matraz Erlenmeyer debajo de la bureta y sin dejar de agitar abrimos
la llave de la bureta teniendo un goteo constante y moderado.
8.- Debajo del matraz Erlenmeyer pondremos una hoja blanca, para poder
visualizar el cambio de la disolucin cuando ocurra este cerramos la bureta y
anotamos el volumen gastado de cido actico.
Resultados
Tabla 2.- Resultados experimentales del volumen gastado de cido actico
Volumen ocupado de NaOH
10 ml

Volumen gastado de cido actico.

20.9 ml

10 ml
10 ml

20.9 ml
20.4 ml
PROMEDIO: 25.7 ml

Concentracin del cido actico

N1V1=N2V2
N1 (0.0207L)= (0.0913N)(0.01L)
N1 =

(0.013N)(0.015L)
(0.0257L)

N1= 0.044 N
Conclusiones
Pudimos obtener la concentracin del cido clorhdrico, tuvimos errores en cuanto
a que no dejamos los matraces del mismo color, los de color durazno (matraz 2 y
3) tuvieron volmenes de 20.9 y 20.4, el No. 1 al llegar al volumen 20.9 quedo de
color amarillo y por no utilizar un volumen ms grande que no cuadrara en
nuestros clculos lo dejamos as, nosotros pensbamos que con solo tener
volmenes no tan distantes y un cambio de color est bien, pero la profesora nos
coment que lo importante era dejar todos del mismo color.
EXPERIMENTACIN 5. TITULACION DE UN PRODUCTO COMERCIAL
Problema de estudio
Determinar experimentalmente la acidez o basicidad de un producto comercial o
natural, volumtricamente.
Hiptesis

Mediante la neutralizacin de nuestro producto comercial (sidra) con NaOH,

podemos encontrar la concentracin de la sidra.
Procedimiento
1.- Colocar 30 ml de nuestro producto comercial en un vaso de precipitado, para
ponerlo a hervir y liberar el CO2.
2.- Enumerar los matraces del No. 1 al No. 3
3.- Despus de dejar enfriar un poco colocar 10 ml de sidra en cada uno de los
matraces.
4.- Acomodar la bureta en el soporte universal y con ayuda de un embudo llenar
con el NaOH, hasta donde podamos dar lectura correctamente.
5.- Abrir la llave de la bureta a un goteo constante y minimo, por lo mientras que se
mueve circularmente el matraz que contiene la sidra, mantener asi hasta que
ocurra un cambio de color.
6.- Anotar resultados.
Tabla 2.- Resultados experimentales del volumen gastado de Hidrxido de
sodio
Volumen ocupado de sidra.
10 ml
10 ml
10 ml

Concentracin de la sidra
N1V1=N2V2
(0.0913N)(8.4x10-3 L)= N2 (0.01L)
N1 =

(0.013N) (8.4x10-3 L)

Volumen gastado de Hidrxido de

sodio
8.4 ml
8.6 ml
8.3 ml
PROMEDIO: 8.4 ml

(0.01L)
N2= 0.077 N
Conclusiones
BIBLIOGRAFIA
1. Daniel, W. W. 1991. Bioestadstica. Editorial Limusa. Mxico.
2. Day, R. A. y Underwood, A. L. 1989. Qumica Analtica Cuantitativa, 5 Edicin.
Editorial Precentice-Hall Hispanoamericana, Mxico.
3. Day, R. A. Jr., Underwood, A. L. 1989. Qumica Analtica Cuantitativa 5 Ed.,
Prentice-Hall Hispanoamericana, Mxico.
4. Harris, D. C. 1992
Iberoamericana, Mxico

Anlisis

Qumico

Cuantitativo.

Grupo

Editorial

5. http://laguna.fmedic.unam.mx/ Leonor
6. http://www.odonto.unam.mx/pdfs/bioquimica_experimentalparte3_defi.pdf
7. Douglas A. Skoog, 2015. Fundamentos de qumica analtica. 9 a. ed. Editorial
Editorial: Cengage Learning, Espaa.