CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS No.

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Prctica 4. Dilucin Bacteriana.
Sub-mdulo 3: Ejecuta tcnicas de identificacin de Microorganismos con base a las
normas.
Integrantes: Chavira Ruiz Teresa Edith, Mercado Galaviz Diana Laura, Mercado Portillo Saira
Nayeli, Morales Cardona Andrea Isabel, Muos Armenta Alejandra, Nieves Flores Sergio Aarn,
Olivas Barrientos Lizbeth Tatiana, Portillo Robles Javier Armando.
Facilitadora: Ing. Acosta Bezada Jessica Alicia
Fecha de Inicio: 20 de octubre de 2014 Fecha de Finalizacin: 28 de octubre de 2014
Introduccin:
En diversos estudios microbiolgicos (como
anlisis de alimentos, de agua de bebida, de
productos farmacuticos o del medio
ambiente entre otros), se requiere conocer el
nmero de microorganismos presentes en un
material con un objeto de determinar su
calidad. El procedimiento es esencialmente el
mismo que para la medida del crecimiento de
las poblaciones de bacterias.
El crecimiento de poblaciones microbianas
puede determinarse mediante mtodos de
medida de la masa total celular, que
generalmente es directamente proporcional
al nmero de clulas, (mtodos de
determinacin del peso de la actividad del
cultivo o mtodos turbidimticos) o por la
determinacin del nmero de clulas.
Mediante el uso de sta tcnica de simple
ejecucin y fcil interpretacin, se puede
evaluar diferentes grupos bacterianos segn
el medio de cultivo que contenga el frasco.
sta tcnica est Recomendada por el
Instituto del Petrleo (API) para evaluar
calidad biolgica en aguas de inyeccin en
recuperacin secundaria y tambin es
ampliamente usada en evaluacin de
problemas microbiolgicas en aguas de
refrigeracin.
Resumen:
Lo que se realizo en sta prctica fue la
observacin de la dilucin bacteriana con
muestras de agua en tubo de diferentes
partes de la ciudad. Al mismo tiempo se uso
de inoculo y se estriaron las muestras en
distintos agares; para as poder observar
cuantas bacterias hay en el agua que
tomamos. Se supona que en la dilucin de
cada tubo ira disminuyendo, pero resulto al
revs, no muy bien. Sin embargo supimos
cuales eran los resultados deseados, y los
conocimientos que se adquirieron fueron
satisfactorios. Al finalizar la prctica
esterilizamos todo el material para dejarlo
listo para prcticas futuras.
Abstract:
During this study it was observed the
bacterial diluted inside test tubes with water
samples form different parts of the city. At the
same time the samples were contaminated
and grooved in different agar plates with the
intention of being able to observe how much
bacteria is present in the water that we drink.
The assumption was that the dilution in every
test tube was to decrease in volume, but we
observed that the dilution volume did not
change. However, because we knew what
results were expected, the knowledge
obtained is satisfactory. After the study, all
equipment used was sterilized in order to be
used in future studies.
Materiales y Mtodos:
En la realizacin de esta prctica se utilizaron
los siguientes:
Materiales:
7 cajas petri
21 tubos de ensaye
Pipeta con propipetero
Asa
3 mecheros

Reactivos:
Agar nutritivo
Caldo nutritivo
Agua estril
Muestra de Agua de la llave

Procedimiento:
1. En el laboratorio se prepararon 2
tipos de cultivos; medios de cultivo
nutritivo (mesas 1, 2 y 3) y caldo
nutritivo (4, 5 y 6).
2. Se realizan los clculos necesarios
para preparar 320 ml del caldo
(considerando el margen de error)
con 2.56 gr.
3. Se vierten en 28 tubos de ensaye
con 10 ml cada uno para obtener 4
series de 7 tubos, que se
compartirn con otra mesa para
tener 2 series en total.
4. Se preparan los tubos para proceder
a esterilizar.
5. Posteriormente se reparten los
diferentes medios para que cada
mesa tenga 14 tubos con el caldo y 7
con 9 ml de agua estril cada uno y 7
cajas petri con el medio nutritivo.
6. En seguida se etiquet todo del 1 al
7.
7. Se toma un ml de la muestra de agua
y se verte al tubo de ensaye #1,
luego se toma un ml de ese tubo y se
verte al #2, del mismo tubo se toma
una muestra y se deposita en el #3,
as hasta llegar al tubo #7. NOTA: se
debe de lavar la pipeta con agua
estril cada vez que se vaya a tomar
el ml de muestra de cada tubo.
8. Con el asa previamente esterilizada
se toma una muestra del tubo #1 y
se realiza el estriado correspondiente
en la caja #1, del tubo #2 a la caja
#2, hasta llegar al final.
9. Se repite el procedimiento No. 7 pero
con las dos serie de caldo.
10. Se introducen a la incubadora por al
menos 24 horas.
11. Se toma nota de la turbidez
producida en los caldos y del
crecimiento bacteriano en las cajas.

Resultados:
Morfologa colonial.
Caja o
Agar
Morfologa
Nutriti
vo 1
(2)Convexa,circular,redonda,amarilla
(2)Burbuja,circular,redonda
(2)Transparente,planas,irregulares,red
ondas
(1)Blanca,papilada,irregular
(5)Amarillas,puntiformes,nodesarollad
as
Nutriti
vo 2
(1)Amarillas verdosas,plana.irregular
filamentosa
(15)Blancas,convexas,circular,redonde
adas
(2)plana,filamentosas
Nutriti
vo 3
(5)Puntiformes,planas,circular,blancas
(1)Puntiforme,redondeada,blanca
(3)circular,irregular,planas,blancas
(8)puntiforme,irregular,amarillas
(2)Fusiforme,irregular,entero
Nutriti
vo 4
(1)Umbeliforme,circular,entera,amarilla
(1)circular,rizoide,blanca
Nutriti
vo 5
(3)Blancas
(4)Circular,blancas,enteras
(15)Amarillas,irregulares,puntiformes
(3)Umbeliforme,irregular,blanca
Nutriti
vo 6
(5)Puntiformes,amarillas,irregulares
(1)Irregular,blanca.ondulada
Nutriti
vo 7
(3) circulares,enteras,blancas
(2)puntiformes.amarillas,circulares
(1)Ondulada,irregular,blanca

Morfologa bacteriana.

Sin embargo no se olvidara mencionar la
frmula para calcularla:




Anlisis de Dilucin.
El crecimiento en tubo no puede ser
calculado de manera correcta, pues en el
momento de la realizacin de esta hubo
contaminacin que afect de manera
significativa los resultados.
Conclusin:
Chavira Ruiz Teresa Edith:
Caj
a
Color Medio de
cultivo
Morfologa Gram
1 Mora
da
Nutritivo
1
Cocos Tinci
n mal
hecha
1 Amb
os
(erro
r)
Nutritivo
4
Estracocos Positiv
a
4 Mora
da
Nutritivo
5
Espiroquet
a
Positiv
a
En esta prctica pude observar las bacterias
que contiene el agua de la llave, tambin
aprend hacer diluciones en tubos de
ensayo, y logre identificar las bacterias del
agua, el conteo de sus colonias y sus formas.
Mercado Galaviz Diana Laura:
En la prctica realizada se pudo aprender la
lectura de poblacin a travs del nmero ms
probable (NMP) que fue realizada con ayuda
de una tabla y una frmula que se aplico para
esta.
Tambin podemos aadir a lo que visto pero
siempre til repasar la cuenta de colonias,
identificacin de colonias, tincin e
identificacin bacteriana.
Las lecturas de nmero ms probable no
pudieron ser realizadas a causa de la
contaminacin.
Mercado Portillo Saira Nayeli:
En sta prctica el propsito principal fue
aprender a realizar la dilucin bacteriana,
como el mismo nombre del experimento lo
dice, y poder saber a qu riesgos nos
exponemos. En este caso se analizaron
algunas muestras de agua de diferentes
viviendas de la ciudad; y se pudo notar como
el agua que bebemos no est muy
contaminada como parece, s, tiene bacterias
y no nos damos cuenta, pero la prctica nos
ayudo a ver qu grmenes y
microorganismos hay en lo que nuestro
cuerpo ingiere. Al transportar lo que hubo en
un tubo (o sea una muestra) hacia otro tubo
(1 ml) de la misma alcuota, se pasaban
bacterias de un lado a otro, y lo que se tena
que obtener al final era que mientras lo
diluyramos en 7 tubos, la contaminacin
fuera disminuyendo. Desgraciadamente no
obtuvimos los resultados deseados, sin
embargo supimos como debera de haberse
obtenido con los resultados correctos. Se
pudo hacer morfologa bacteriana, colonial y
tincin. Hasta se avanz con algunos agares
de la prxima prctica.
Morales Cardona Andrea Isabel:
En esta prctica se realizo un sondeo de las
tuberas de agua potable de distintos puntos
de la ciudad. Para esto se utilizaron distintos
mtodos que van desde la realizacin de una
dilucin bacteriana en diversos estudios
microbiolgicos (como anlisis de alimentos,
de agua de productos farmacuticos o del
medioambiente entre otros), se requiere
conocer el nmero de microorganismos
presentes en un material con objeto de
determinar su calidad. El procedimiento es
esencialmente el mismo que para la medida
del crecimiento de las poblaciones de
bacterias. Que en este caso se empleo una
serie de tubos de ensaye de las muestras de
agua que a su vez se utilizo y tomo un
amuestra de cada tubo y se inoculo en un
medio de cultivo nutritivo, gracias esto
pudimos ver si haba o no contaminacin en
la muestra, tambin realizamos Una serie de
caldos a los que se les inoculo las muestras
de agua.
Hay que tener mucho cuidado al momento de
realizar esto y siempre hacerlo en el triangulo
de seguridad ya que al momento de ver el
crecimiento en los tubos que contenan los
caldos, estos tuvieron un crecimiento
diferente al esperado ya que hubo
contaminacin.
En conclusin gracias a esta prctica
reafirmamos conocimientos que hemos
estado investigando en clase, fue muy
interesante realizar esta prctica, tenemos
mucho que aprender ya que los errores
pueden hacer fallar la prctica y causar
Muos Armenta Alejandra:
Como conclusin propongo el que El cultivo
de microorganismos tiene por objeto su
estudio e identificacin, que se efecta
mediante las caractersticas que presentan
las bacterias. Dichas caractersticas
dependen del comportamiento de las
poblaciones, ms que de los organismos
individualmente, de ah que sean importantes
los materiales y mtodos para conseguir el
desarrollo y la multiplicacin.
Nieves Flores Sergio Aarn:
La dilucin bacteriana por el nmero ms
probable (NMP) se emple para estimar el
nmero de microorganismos presentes en
una muestra de agua tomada de la llave,
para as darnos cuenta que tan
contaminadas estn las tuberas de nuestra
ciudad y que tanto riesgo corremos de
contraer una infeccin por el consumo de
esta agua, no se pudo saber con exactitud o
aproximacin la cantidad de contaminacin
ya que al realizar la dilucin, esta se hizo
fuera del triangulo de calor, lo que permiti la
penetracin de diversas bacterias a los
caldos, se observ mayor turbidez en los
tubos #2 y #6, an mayor que en el tubo #1
donde se supone debe de observarse mayor
crecimiento. An as en el crecimiento de
bacterias en las cajas se observo poco
crecimiento al paso de 24 horas, pero al
transcurso de 4 das, se not una gran
cantidad de bacterias.
Olivas Barrientos Lizbeth Tatiana:
En esta prctica observamos la
contaminacin del agua de la que tomamos,
y gracias a ella pudimos observar que tipos
de bacterias tenan, y que tipos de gran eran,
tambin aprendimos a esterilizar el agua.
Portillo Robles Javier Armando:
Mi conclusin es que en esta prctica no nos
sali bien ya que en vez de lo que iba a
pasar nos sali al revs primero se trajo de
distintas partes de la ciudad despus se
inoculo y se estri el agua para poder ver las
bacterias que contenan, el objetivo no se
logro obtener as que no tengo una buena
conclusin de esta practica.

Discusin:
Por medio de esta prctica aprendimos hacer
diluciones en caldos, tambin se elaboraron
cultivos con agua de la llave de cada una de
las casas en diferente sector de la ciudad, se
elaboraron cultivos en nueve cajas petri pero
no se obtuvo mucho crecimiento de bacterias
lo que nos permiti hacer bien el conteo e
identificacin de las colonias, en la dilucin
no sali el objetivo ya que se haban
contaminado los tubos. En las tinciones solo
en dos se pudieron observar las morfologas
ya que las otras no estaban bien teidas.
Bibliografa:
LABORATORIO MICROBIOLOGA
INDUSTRIAL (MAG). La Plata, Buenos Aires.
(2013).
Diseo y Desarrollo. Recuperado de:
http://www.laboratoriomag.com.ar/sitio2/index
.php/tecnicas-recomendadas/tecnica-de-
recuento-por-dilucion

SLIDESHARE. LABORATORIO DE
BACTERIOLOGIA Y MICOLOGIA. Recuento
Bacteriano. (25/abril/2011).
Autor: Dra. Natalia Izurieta Cergneux.
Recuperado de:
http://es.slideshare.net/nataliaizurieta/laborat
orio-no-4-recuento-bacteriano-7723447
Anexos:
Preparacin de Dilucin.

Estriado de muestra de agua en agar.

Observacin de resultados en caldos.

Observacin de Tinciones y morfologa
bacteriana.