LA CLULA EUCARIOTA CLULA EUCARIOTA. GENERALIDADES.

Al observar con un microscopio un corte de tejido animal o vegetal, se aprecia que est constituido por pequeas unidades similares entre s, las clulas, que son la base estructural y funcional de los seres vivos. De los estudios realizados en corcho por Robert Hooke (1665), surge la palabra "clula", que designa a las pequeas cavidades de la pared de ese vegetal, constituido fundamentalmente por celulosa. Posteriormente, el trmino, se aplic a todos los organismos vivientes microscpicos, que tienen vida independiente, es decir, a aquellos organismos que, colocados en un ambiente con las condiciones adecuadas de oxgeno, CO2, nutrientes, pH y temperatura mantienen el metabolismo celular. Los organismos pueden ser unicelulares y pluricelulares. Los unicelulares constituyen los microorganismos, como por ejemplo, las bacterias: y los pluricelulares, por el contrario, estn constituidos por varios tipos celulares, cada uno de los cuales realiza determinadas funciones especializadas. Las clulas pueden ser de dos tipos: Procariotas, cuando el material gentico se encuentra libre en el citoplasma sin ninguna membrana que lo asle, y Eucariota, cuando el material gentico est aislado por un sistema de membranas formando el ncleo celular. TEORA CELULAR. La teora celular plantea esencialmente que todos los organismos estn compuestos por clulas y elementos que estas producen. El estudio de las clulas, se debe al trabajo cientfico de muchos investigadores, el cual comienza en el siglo XVII con la utilizacin de lentes y el invento del microscopio. A principios del siglo XIX con los descubrimientos de diversos autores comienza a elaborarse y quedar definida la teora celular. En la actualidad la teora celular plantea lo siguiente: . . . La clula es la unidad estructural y funcional de los organismos vivos. Las clulas de un organismo determinan las caractersticas estructurales y funcionales del mismo. La clula constituye por tanto la unidad de la materia viviente.

Las clulas se originan a partir de otras clulas y la continuidad se mantiene a travs de la informacin contenida en el material gentico celular. Comenzaremos a estudiar las caractersticas generales de las clulas haciendo siempre referencia a la clula eucariota, pues el estudio de las clulas procariotas se har en otras disciplinas, como la Microbiologa.

FORMA Y TAMAO CELULAR. La forma de las clulas es muy variable, y existen mltiples factores que la determina. En general, la forma depende de la funcin que realice la clula; por ejemplo, las clulas musculares, especializadas en la contraccin, presentan una forma alargada y las clulas nerviosas, especializadas en la conduccin de estmulos, tienen largas prolongaciones que se ramifican. Otras clulas, como los glbulos blancos de la sangre, adoptan una forma esfrica debido a la tensin superficial dentro de los vasos sanguneos, pero cuando salen de los mismos a ejercer sus funciones de defensa, presentan una forma irregular con pequeas prolongaciones seudpodos que facilitan su movimiento. Las clulas de los epitelios que estn muy unidas entre s, son polidricas y pueden verse aplanadas, cbicas cilndricas.

Fig. 3.1 Se muestran las variedades de formas celulares, determinadas por mltiples factores, siendo la ms importante, la funcin que realiza la clula.

El tamao celular tambin varia, pero se pueden clasificar como lo hizo el histlogo espaol Santiago Ramn y Cajal en: Clulas pequeas ------- menos de 12 micrmetros Clulas medianas ------- entre 12 y 30 micrmetros Clulas grandes --------- ms de 30 micrmetros. Existen clulas con un tamao de aproximadamente 4 m como es el de las clulas granulosas del cerebelo y otras que alcanzan tamaos de 100 m o ms como las neuronas motoras del asta anterior de la mdula espinal.

CARACTERSTICAS GENERALES DE LAS CLULAS EUCARIOTAS. Todas las clulas eucariotas, independientemente de la funcin que realicen tienen en comn: La presencia de una membrana plasmtica que delimita el contenido celular, del medio que la rodea. Una endomatriz fluida (citosol) compuesta por una solucin de protenas, electrolitos y carbohidratos, en la que est presente un sistema de endomembranas que delimitan: compartimentos (organitos) en los cuales se desarrolla el metabolismo celular y sus productos (inclusiones) y el mayor de los compartimentos, el ncleo que constituye por su contenido en ADN, el centro rector de la actividad metablica celular. La presencia en la matriz citoplasmtica de estructuras proteicas filamentosas (microtbulos, microfilamentos y filamentos intermedios), que constituyen el citoesqueleto.

Fig. 3.2. Se muestra un esquema de una clula vista al Microscopio electrnico. Se observa el ncleo centralmente como un cuerpo redondeado, limitado por una envoltura nuclear en la que se aprecian poros. Debajo se observan las cisternas del Retculo endoplasmtico rugoso, por la presencia de ribosomas adheridos a las membranas. El retculo endoplasmtico rugoso se continua con el retculo endoplasmtico liso. Entre las cisternas del retculo se pueden identificar varias mitocondrias, con su doble membrana. Por encima del ncleo, observamos el Complejo de Golgi, con sus cisternas caractersticas y las vesculas asociadas a las mismas. Las estructuras filamentosas que se ven en el citoplasma apical, son elementos del citoesqueleto. Los espacios que no estn ocupados por organitos o por el citoesqueleto, se corresponden con la matriz celular.

La Matriz citoplasmtica con los componentes del citoesqueleto, los organitos, las inclusiones y el citosol, constituyen el citoplasma que observamos en las clulas con la coloracin de rutina que se emplea en Histologa es decir Hematoxilina-Eosina (H/E). En el citoplasma, se produce, almacena y libera energa; se sintetizan protenas, lpidos y polisacridos y se llevan a cabo otras mltiples funciones. Su organizacin, renovacin y

generacin depende de la informacin contenida en el ncleo. El volumen del citoplasma es proporcional al del ncleo. La relacin ncleo citoplasma, vara de un tipo celular a otro; en la mayora de las clulas el citoplasma excede en tres a cinco veces el volumen nuclear. COMPARTIMENTACIN CELULAR. El concepto compartimentacin define el hecho de que existan distintos espacios celulares, limitados por una membrana, que realicen distintas funciones, lo cual crea en la clula una divisin del trabajo: por ejemplo, en las mitocondrias se efecta la respiracin; en los lisosomas, la digestin celular; en el retculo endoplasmtico, la sntesis de diversas sustancias; etctera. Es por esto que podemos hablar de organitos membranosos y organitos no membranosos. A partir de la utilizacin del microscopio electrnico (M/E), cambi totalmente la imagen estructural que se tena de la clula. Esto se debi a que en el hialoplasma, aceptado hasta entonces como un complejo coloidal, se observaron un conjunto de estructuras, algunas rodeadas de membrana, y otras no, que condujeron a la clasificacin que actualmente tenemos de los organitos.

Fig. 3.3 Se muestran en el esquema los diferentes organitos presentes en la clula.

Los organitos (organelos) membranosos son: . Retculo endoplasmtico liso y rugoso. . Aparato de Golgi. . Mitocondrias. . Lisosomas. . Peroxisomas. Los organitos (organelos) que no poseen membranosos incluyen: . . Ribosomas. Centrolos.

El lmite de la clula est determinado por la membrana plasmtica. Los organitos son: retculo endoplasmtico, aparato de Golgi, mitocondrias, ribosomas, lisosomas, peroxisomas y centrolos. Las inclusiones son lpidos, glucgeno, caroteno, melanina y otros. MEMBRANA CITOPLASMTICA. A fines del siglo pasado, a partir de estudios bioqumicos y de permeabilidad, se determin la existencia en todas las clulas de una estructura de naturaleza lipoproteica, no visible al microscopio ptico, y que se denomin membrana plasmtica o plasmalema. Debido a que el poder de resolucin del microscopio ptico no permite la visualizacin de la estructura de la membrana, los investigadores que trabajaron al respecto antes de la dcada del cincuenta de este siglo, plantearon diferentes modelos hipotticos de membrana, los cuales trataban de conjugar la composicin qumica de ella, con sus propiedades de permeabilidad. Con el desarrollo de las tcnicas de microscopa electrnica, a partir de 1950, se aprecia la membrana citoplasmtica, formada por tres lminas con un grosor de 7.5-10 nm. La estructura trilaminar formada por dos capas oscuras perifricas y una capa central clara, no solo se observaba en la membrana plasmtica, sino que tambin fue observada en las membranas de todos los organitos membranosos, por lo que surge el concepto de unidad de membrana planteado por Robertson. El concepto de unidad de membrana en la actualidad se ha reconsiderado debido a que la imagen observada al M/E corresponde mas bien a un artefacto de la tcnica empleada en la fijacin, que a la estructura de las membranas celulares, as como, la composicin qumica y la funcin de las membranas es diferente en las clulas y dentro de una misma clula. En la composicin qumica de la membrana plasmtica estn presentes lpidos, protenas y carbohidratos. Las proporciones de estos tres elementos varan de un tipo celular a otro. Los lpidos, ms abundantes en la membrana, son: fosfolpidos, triglicridos, esteroides y glicolpidos, los cuales se organizan formando una bicapa que se corresponde con la lnea central clara que se observa, al M/E, en la estructura trilaminar de la membrana. Las protenas, por su parte, son molculas anfteras que se encuentran formando una complicada estructura tridimensional. Su disposicin en la membrana es ms compleja que la de los lpidos, y en la estructura trilaminar son responsables de las capas oscuras perifricas que en ellas se observan. Los carbohidratos se localizan en la membrana unidos a los lpidos y a las protenas formando glicolpidos y glicoprotenas. La presencia de los carbohidratos en la cara externa de la membrana le confieren cierta asimetra (de la que hablaremos con posterioridad). Estos carbohidratos son la base de una estructura filamentosa que rodea a la cara externa de la membrana plasmtica y que se denomina cubierta celular o glicoclix.

Fig. 3.4 Se muestra la estructura trilaminar de la membrana plasmtica.

La estructura trilaminar tan relativamente sencilla que se observa de la membrana plasmtica al M/E, no explica las propiedades fisiolgicas tan complejas que ella presenta; por lo que a partir de su observacin al M/E. han sido muchos los modelos moleculares hipotticos que se han planteado para explicar la organizacin molecular de los compuestos constituyentes de la membrana. En estudios realizados en membranas de eritrocitos, se determin que la cantidad de lpidos presentes en ella eran suficientes para que los lpidos se organizaran formando una bicapa. No es hasta 1970, que producto de observaciones realizadas por Singer con las tcnicas de congelacin-fractura y congelacin-grabado, que se plantea un modelo que respondiera a los conocimientos que se tenan en la membrana. En esta tcnica se fractura la membrana a nivel central, separando las dos zonas proteicas. Contrario a lo que se esperaba, en la zona de fractura se observaron unas estructuras globulosas que se hallaban encajadas en la membrana; posteriormente fueron identificadas como protenas globulares. Esto hizo cambiar en cierto aspecto el concepto molecular que se tena de la membrana en relacin con las protenas, y es as que en 1972, Singer y Nicholson, plantean el modelo de Mosaico fludo.

Fig. 3.5. A. Modelo de Mosaico fluido. Se observan las protenas integrales, las perifricas, la bicapa lipdica y las glicoprotenas y glicolpidos de la cubierta celular. B. Estructura trilaminar.

El modelo plantea una matriz lipdica acuosa, y protenas de tipo globular que se disponen de dos formas: en la periferia y en todo el espesor de la membrana. Los lpidos y las protenas estn dispuestos en una forma parecida a mosaicos permitiendo cierto movimiento de lateralizacin y rotacin. Las primeras que atraviesan todo el espesor de la membrana, se denominan protenas o integrales o extrnsecas, las otras se denominan protenas perifricas o intrinsecas . Este modelo hace pensar en un mar de lpidos en el que estn incluidos "tmpanos" que son las protenas. Muchas de las molculas de protenas integrales que atraviesan la bicapa lipdica, estn unidas de manera directa o indirecta a microtbulos y microfilamentos del citoplasma. La membrana plasmtica presenta asimetra, que establece ciertas diferencias entre las superficies internas y externas. La distribucin asimtrica significa la distribucin desigual de los componentes moleculares que forman parte de la membrana, pudindose encontrar los mismos formando parte de la cara protoplasmtica y en otros casos de la cara extracelular. Por ejemplo, los oligosacridos unidos a glicoprotenas y glicolpidos forman parte de la cubierta celular o glicoclix, es decir, se limitan a la cara externa de la membrana. Tambin, en la mitad de la superficie externa se localizan varias molculas receptoras, las cuales se relacionan con elementos del medio externo de la clula. Por otra parte se ha determinado que el contenido de lpidos y protenas de ambas caras de la membrana es diferente. Tambin, se han observado microfilamentos y microtbulos unidos a protenas de la parte citoplasmtica de la membrana y que, al parecer, controlan el movimiento de ellas. La membrana plasmtica funciona como una barrera protectora que mantiene la integridad del protoplasma a la par que determina el transporte de sustancias entre el medio interno celular y el medio externo. La membrana es selectivamente permeable y muestra distintos mecanismos de transporte, los cuales van desde la simple difusin u osmosis, hasta procesos tan complejos como son la pinocitosis y fagocitosis. En la membrana se generan potenciales elctricos que se transmiten como una onda de excitacin de un punto a otro

de la clula. Por ltimo, en la membrana hay molculas que funcionan como receptores hormonales en el reconocimiento de determinadas hormonas hidrosolubles.

MATRIZ CITOPLASMTICA O ENDOMATRIZ. Como explicamos anteriormente, los componentes del citoesqueleto, los organitos y las inclusiones citoplasmticas estn suspendidos en una solucin de protenas y otras sustancias que se denomina citosol o componente fluido de la matriz. La matriz citoplasmtica est formada por: Componentes para las funciones metablicas. Enzimas solubles, que son componentes proteicos que intervienen en la gluclisis anaerbica, en la activacin de los aminocidos para la sntesis proteica y en general, en el metabolismo celular (como catalizadores biolgicos). Protenas estructurales, en su mayora de forma globular y de las cuales dependen la viscosidad celular, los movimientos internos y ameboideos, la formacin de microtbulos y otros. cidos ribonucleicos, que intervienen directamente en la sntesis proteica.

CITOESQUELETO. El citoesqueleto, est constituido por microfilamentos, filamentos intermedios y microtbulos que forman una red tridimensional de soporte al resto de las estructuras citoplasmticas y que se fija a protenas de la membrana. Mientras ms caprichosa es la forma celular, ms desarrollo es necesario en este andamiaje proteico, ya que contribuye a la arquitectura celular, la fijacin de los organitos y a sus movimientos a travs del citosol. Tambin facilita los movimientos celulares y el mantenimiento de las uniones celulares.

Fig. 3.6 A. Microtbulos con sus dimeros de tubulina y los filamentos de actina. B. Microscopia electrnica donde se observan elementos del citoesqueleto.

Actualmente se conocen tres categoras de filamentos. En la primera categora, se incluyen los microfilamentos que presentan entre 5-6 nm de dimetro y que estn compuestos por la protena actina. Esta protena fue identificada primeramente con los msculos, actualmente se ha comprobado que est presente en muchos otros tipos celulares. Estos filamentos se localizan por debajo de la membrana plasmtica y forman, junto con otros tipos de filamentos, el velo terminal. Asociados con estos filamentos, se pueden apreciar tambin otras protenas: troponina, tropomiosina y -actina. La segunda categora de filamento incluye los filamentos de miosina, que al igual que la actina se observ primero en las clulas musculares. Son filamentos ms gruesos que los filamentos de actina y pueden llegar a medir hasta 10 nm de dimetro. Al igual que en el msculo forma complejos con la actina e interviene en los movimientos celulares. El mecanismo de contraccin de filamentos de actina y miosina, lo estudiaremos en el captulo de tejido muscular. Sistemas contrctiles no musculares se han demostrado en muchos animales, por ejemplo, en las clulas del epitelio intestinal se ha comprobado la presencia de actina en las microvellosidades que se conectan a los microfilamentos y a las protenas de la membrana. La tercera categora de filamentos incluye los filamentos intermedios; estos tienen entre 7-10 nm de dimetro y se relacionan con el mantenimiento de la forma celular, constituyendo una malla a travs del citoplasma. Los tipos de filamentos intermedios son: filamentos de citoqueratina, neurofilamentos, filamentos de vicentina, filamentos de desmina, filamentos gliales y filamentos heterogneos. En el ncleo, se unen a la superficie interna de la membrana interna de la envoltura nuclear y se denominan lmina nuclear. Los microtbulos se encuentran en casi todas las clulas del organismo. Son estructuras alargadas de un dimetro de unos 25 nm y de longitud variable y que tienden a ser rectos, lo que implica que tienen cierta rigidez, aunque son lo suficientemente flexibles para que se doblen sin romperse. Los microtbulos ayudan a la conservacin de la forma celular, facilitan el flujo de diversas partculas y sustancias a lo largo de las clulas, siendo caractersticas en la clula nerviosa, la cual presenta en sus prolongaciones los llamados neurotbulos, que son en realidad microtbulos. Otra funcin fundamental de los microtbulos es en el movimiento y la formacin del huso mittico.

Fig. 3.7 Filamentos intermedios y centrolos.

CENTRIOLOS. Los centriolos los estudiamos en este espacio por su relacin con los microtbulos, ya que actan como un centro organizador de los mismos. Los centrolos son dos estructuras cilndricas, formadas por microtbulos, que se encuentran constituyendo el centrosoma o regin perinuclear. Los centriolos miden 0,5 m de longitud por 0,25 m de dimetro, y presentan un extremo ocluido y otro abierto. Cada par de centriolos estn orientados perpendicularmente. Las clulas presentan uno o dos centrosomas, pero hay clulas poliploides (clulas hepticas) que pueden presentar ms. Los centriolos vistos al M/O se observan como dos pequeos puntos, pero, observados al M/E se observan formados por una pared de microtbulos. Esta pared, cuando se corta transversalmente, se aprecia que est constituida por nueve grupos de tres microtbulos (tripletes), los que se disponen simtricamente y equidistantes entre s. La matriz pericentriolar es densa, y hacia ella convergen microtbulos citoplasmticos. o Los centriolos se originan formando un ngulo de 90 con respecto al centriolo preexistente, y los tripletes se forman mediante un mecanismo de ensamblaje de tubulina, similar al de la formacin de los microtbulos. NCLEO. Una de las caractersticas de las clulas eucariotas es que presentan el material nuclear organizado y delimitado por una envoltura membranosa, a travs de la cual se establece el intercambio de material con el citoplasma.

Ese ncleo que observamos en la clula eucariota en perodos de no divisin, se denomina Ncleo en Interfase. NCLEO EN INTERFASE. En el ncleo se aprecia, limitndolo del citoplasma, la envoltura nuclear, y en el interior del ncleo se observan grnulos de cromatina de diferente tamao, uno o dos nuclolos y la matriz nuclear.

Fig. 3.8. Esquema de una imagen de un ncleo al Microscopio electrnico donde se aprecian todos sus componentes.

El tamao del ncleo es de 5-15 m aproximadamente y aunque las clulas ms grandes son las que tienen un ncleo mayor, esto no constituye una regla. Lo que si existe para cada tipo celular es una relacin entre el volumen del ncleo y el del citoplasma, que se expresa por: Volumen nuclear volumen celular-volumen nuclear El nmero por clulas varia, aunque lo ms frecuente es la presencia de un solo ncleo. Se pueden encontrar clulas con dos ncleos, como las clulas hepticas o las cartilaginosas. Otros tipos de clulas presentan un mayor nmero de ncleos y se denominan multinucleadas, por ejemplo la fibra muscular esqueltica. La forma del ncleo es variable, generalmente es de forma esfrica, pudiendo presentarse de forma ovoide, arrionada, fusiforme o alargada y multilobulada. La disposicin del ncleo es variable entre los distintos tipos celulares, pero constante para un mismo tipo de clula, sobre todo en las clulas que = relacin ncleo-citoplasma