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    INFORME de LABORATORIO Hidrolisis de Polisacaridos2

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    Este informe de laboratorio describe un experimento para determinar la cantidad de azúcar reductor producido por la hidrólisis de almidón utilizando 3,5-dinitrosalicilato de sodio. El experimento involucra la hidrólisis ácida del almidón a diferentes tiempos y la medición espectrofotométrica de los azúcares reductores producidos. Los resultados muestran que la cantidad de azúcares reductores aumenta con el tiempo de hidrólisis, demostrando la hidrólisis progresiva del almidón.

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    INFORME de LABORATORIO Hidrolisis de Polisacaridos2

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    Este informe de laboratorio describe un experimento para determinar la cantidad de azúcar reductor producido por la hidrólisis de almidón utilizando 3,5-dinitrosalicilato de sodio. El experimento involucra la hidrólisis ácida del almidón a diferentes tiempos y la medición espectrofotométrica de los azúcares reductores producidos. Los resultados muestran que la cantidad de azúcares reductores aumenta con el tiempo de hidrólisis, demostrando la hidrólisis progresiva del almidón.

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    Este informe de laboratorio describe un experimento para determinar la cantidad de azúcar reductor producido por la hidrólisis de almidón utilizando 3,5-dinitrosalicilato de sodio. El experimento involucra la hidrólisis ácida del almidón a diferentes tiempos y la medición espectrofotométrica de los azúcares reductores producidos. Los resultados muestran que la cantidad de azúcares reductores aumenta con el tiempo de hidrólisis, demostrando la hidrólisis progresiva del almidón.

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    Este informe de laboratorio describe un experimento para determinar la cantidad de azúcar reductor producido por la hidrólisis de almidón utilizando 3,5-dinitrosalicilato de sodio. El experimento involucra la hidrólisis ácida del almidón a diferentes tiempos y la medición espectrofotométrica de los azúcares reductores producidos. Los resultados muestran que la cantidad de azúcares reductores aumenta con el tiempo de hidrólisis, demostrando la hidrólisis progresiva del almidón.

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    INFORME DE LABORATORIO

    PRACTICA N 2 HIDROLISIS DE POLISACARIDOS

    TUTOR: MIGUEL DELGADO

    INGRID IVONN CASTILLO PREZ


    COD: 35 527 124
    MARCO ALBERTO GALINDO SANCHEZ
    COD: 79 043 070
    FERNANDO LIEVANO PULIDO
    COD: 19 416 825
    ARTURO PRECIADO RODRIGUEZ
    COD: 1023867068

    Bogot noviembre 20 de 2008

    HIDRLISIS DE POLISACARIDOS

    OBJETIVOS:

    Determinar la cantidad de azcar reductor que puede encontrarse


    en una solucin de almidn utilizando 3,5 dinitrosalicilato de sodio.

    Reconocer la hidrlisis de polisacridos en la solucin de almidn


    cuando esta cambia de cambia de color.

    realizar la medicin de espectrofotomtricamente.

    MARCO TEORICO:

    POLISACARIDOS:
    En este grupo se incluyen sustancias amorfas de peso molecular elevado,
    generalmente no definido, que por hidrlisis dan monosas.
    Su formula general es

    Los polisacridos ms importantes son: el almidn, las celulosas, las


    dextrinas, el glucgeno etc.
    Sus principales caractersticas son:

    insolubilidad en el agua, como las celulosas, otros como las


    dextrinas, forman suspensiones coloidales, los almidones se
    hinchan formando engrudos.

    son inspidos.

    no son reductores.

    por hidrlisis se transforman en glcidos de peso molecular cada


    vez menor, la ltima etapa es la obtencin de monosacridos.

    ALMIDN:
    Formula general:

    Se produce en las plantas con clorofila como uno de los principales


    productos de la asimilacin, y se encuentra en forma de granos
    microscpicos en diversas partes del vegetal, principalmente en los
    depsitos de reserva como las semillas o tubrculos.
    En el comercio se conocen como almidn cuando procede de las semillas
    de cereales o leguminosas, y fcula cuando se extrae de los tubrculos,
    qumicamente estas sustancias son idnticas.

    GLUCOGENO:

    Llamado tambin almidn animal, existe como material de reserva en el


    hgado de los mamferos. Es un polvo blanco, amorfo, que se tie de
    negro violceo por el yodo. Los cidos minerales diluidos lo transforman
    en maltosa y glucosa.

    DEXTRINA:
    Son sustancias de constitucin no bien conocida que se consideran como
    productos intermedios en la sacarificacin del almidn, de donde se las
    obtiene.
    Las dextrinas son solubles en agua e insolubles en alcohol. Su olor a pan
    tierno es caracterstico, se utiliza frecuentemente en la fabricacin de
    adhesivos (colas dextrinadas)

    CELULOSA:
    Est constituido por la condensacin de 100-200 molculas de glucosa
    formando largas cadenas, las que se renen, a su vez, en grupos de 50
    macromolculas y forman de celobiosa.

    REACTIVOS:
    Solucin de almidn soluble (6 mg/ml) en buffer fosfato de sodio 0.02 M
    y pH 6.9
    NaOH2, 4 N
    HCI 4 N
    Reactivo 3,5-dinitro salicilato de sodio: (disolver 5 g de cido 3,5-dinitro
    saliclico en 100 ml de NaOH
    2N, calentar. Por separado, adicionar 150 g de nitrato de sodio y potasio a
    250 ml de H2O, calentar.
    Mezclar las dos soluciones y completar a 500 ml)
    Buffer fosfato de sodio 0.02 M pH 6.9 en NaCI 0.005 M.
    NaOH 20%
    Reactivo de Lucas. (134 g de ZnCI2 en 89 ml de HCI concentrado)

    PROCEDIMIENTO:
    El profesor en el momento de la prctica distribuir el trabajo de tal
    manera que cada grupo realice una Hidrlisis diferente sobre el mismo
    polisacrido; por ejemplo el grupo 1 efectuar hidrlisis cida sobre
    almidn proveniente de maicena y el grupo 2 efectuar la hidrlisis
    enzimtica sobre la misma muestra a fin de que puedan comparar los
    resultados.
    La solucin del polisacrido tendr una concentracin de 6 mg/ml y se
    preparar en Buffer fosfato de sodio
    0.02 M pH = 6,9.
    Todos los grupos realizarn la hidrlisis cida de la celulosa en presencia
    de ZnCl2 (o reactivo de Lucas)
    Hidrlisis cida:
    Rotular ocho tubos de ensayo y agregar en orden los siguientes reactivos:
    condiciones
    Solucin almidn, ml
    Agua destilada, ml
    NaOH, 2.4 N
    HCl 4N, ml

    B
    -

    0
    0.4

    1
    0.4

    2
    0.4

    0.4

    0.6

    0.6

    0.6

    tubos
    3
    0.4

    4
    0.4

    5
    0.4

    6
    0.4

    0.6

    0.6

    0.6

    0.6

    0.6

    15

    25

    Colocar los tubos 1 a 6 en un bao mara a ebullicin y dejarlos en los siguientes tiempos:
    Tiempo de incubacin,
    minutos

    12

    Finalizado el tiempo de incubacin, sacar cada tubo y detener la hidrlisis agregando:

    NaOH, 2.4N, ml

    Reactivo 3,5dinitrosalicilato, ml

    Introducir todos los tubos en el bao a ebullicin durante cinco minutos, enfriar y agregar 7 ml de agua destilada.
    Agitar y medir transmitancia a 540 nm. Utilice el B para ajustar el 100% de transmitancia.

    ANALISIS DE RESULTADOS:

    La hidrlisis de los polisacridos puede seguirse midiendo el incremento


    en azcares reductores mediante el Reactivo 3,5-dinitrosalicilato en
    solucin alcalina. El cido 3,5-dinitrosaliclico (de color amarillo) se reduce
    a cido 3-amino-5 nitro saliclico, (rojizo oscuro) produciendo una
    coloracin que se mide espectrofotomtricamente a 540 nm.
    La extensin o porcentaje de hidrlisis se determina comparando la
    cantidad de azcar reductor presente en cualquier tiempo, con la cantidad
    de azcar presente despus de la hidrlisis cida total.
    La hidrlisis de los polisacridos tambin puede efectuarse por medios
    qumicos. Los cidos fuertes diluido catalizan el rompimiento
    indiscriminado de los enlaces glicosdicos, dando como producto final
    glucosa.
    La estructura polisacrida se demuestra en este experimento, ya que el
    nmero de grupos reductores en el medio de reaccin aumenta a medida
    que transcurre la hidrlisis. El progreso de la hidrlisis se mide de la
    misma forma que en la hidrlisis enzimtica.
    TABLA DE RESULTADOS:
    ABSORBANCIA A 540 nm
    TUBOS
    GRUPOS
    ALBUMIN
    AS
    GLOBULI
    NAS
    PROLAMI
    NAS
    GLUTAMI
    NAS

    B
    0.004

    1
    0.077

    2
    0.093

    3
    0.179

    4
    0.186

    5
    0.253

    6
    0.274

    7
    0.041

    8
    0.034

    10

    0.069

    0.107

    11

    12

    13

    0.029

    0.095

    0.098

    14

    0.207

    CONCLUSIONES:

    BIBLIOGRAFIA

    Bioqumica de Harper
    Robert K. Murray
    Peter A. Mayes
    Daryl K. Granner
    Victor W. Rodwell
    Ed. El manual moderno, S.A. de C.V.
    Mxico, D.F.
    1988

    Qumica elemental moderna


    Orgnica
    Celsi- Iacobucci
    Ed. Kapelusz
    Buenos Aires

    Modulo Bioqumica
    UNAD
    2008

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