Gua de Actividades Prcticas Patologa General

Universidad San Sebastin, Campus Valdivia Tutor: Javier Rosas Bahamonde 1er Semestre
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NORMAS GENERALES AL ENTRAR AL LABORATORIO

I.- De las Prohibiciones. Est estrictamente prohibido: * Hablar por celular en clases prcticas. * Sacar fotografas a las muestras (ya sea con celular o cmara digital). * Comer en el laboratorio. * Intercambiarse material en Test de entradas o en Muestra Problema.

II.- De las Obligaciones. Ser de obligatoriedad del estudiante. * Llegar a la hora a clases prcticas. * Traer delantal blanco, limpio y presentable. * Traer croquera o cuaderno de dibujo. * Traer lpices de colores (de similar color a las tinciones histolgicas) * Traer manual de apoyo o clases tericas para complementar el estudio.

III.- De las Responsabilidades. El estudiante al terminar el trabajo prctico: * * * * Debe sacar la muestra con cuidado desde la platina del microscopio. Debe verificar que el microscopio est apagado y desenchufado antes de guardarlo. Debe dejar su rea de trabajo limpia y ordenada. Debe mostrar su dibujo rotulado a los tutores encargados. (ayudantes y /o profesor)

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IV.- De las Calificaciones Prcticas. Estas corresponden al porcentaje real de notas de laboratorio (segn programa de la asignatura y/o syllabus), el porcentaje total de la Prueba Prctica queda a criterio del profesor encargado de la asignatura.

1.- Prueba Prctica. (Muestra Problema) * Se realizar una sola prueba prctica, o varias pruebas que incluirn todas las muestras vistas antes del solemne o certamen o todas durante el semestre, mediante la cual Ud. deber ser capaz de identificar correctamente las caractersticas histopatolgicas que se le pidan. 2.- De las Caractersticas de la Muestra Problema. *La muestra problema tiene una ponderacin de un 65% de exigencia. *Tendr solo una oportunidad para rectificarse de su respuesta, para ello tendr 5 segundos previo aviso de los tutores encargados mediante un cronmetro con alarma a utilizar. *Se preguntar materia terica, al realizar la prueba prctica.

3.- De las Inasistencias a Prueba Prctica. * No habr recuperacin de Prueba Prctica, de tal manera que la inasistencia a aquella evaluacin se calificar con nota mnima de 1,0. * Tampoco rige certificado mdico para esta prueba prctica (ya que es avisada con antelacin) previo calendario acadmico de la asignatura, entregada en la sesin 01 del curso. * Aquellas personas que se sorprenda en actitudes sospechosas de copia o prestando cualquier tipo de material durante el transcurso de esta prueba prctica, se calificar con nota mnima de 1,0.

4.- De las Revisiones de las Actividades Prcticas. * Se realizar 1 revisin global al finalizar el semestrede las muestras, las cuales tienen que estar correctamente dibujadas y rotuladas, ya que el cuaderno tendr una nota de calificacin de actividades prcticas.

Atte. Equipo de Trabajo, Histopatologa.

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EL MICROSCOPIO

Ocular

Revlver Objetivo Brazo

Pinza para sujetar la muestra

Macromtrico

Platina Condensador

Micromtrico Lmpara

Base
Objetivos: 10X: Ampla la imagen en diez veces, con respecto a su tamao original.

Perilla para ajustar la intensidad de la luz

40X: Ampla la imagen en cuarenta veces, con respecto a su tamao original. 100X:Ampla la imagen en cien veces, con respecto a su tamao original; generalmente se utiliza aceite de inmersin para lograr mayor nitidez en la muestra.

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ROTULACIN EN EL CUADERNO CMO REALIZARLA?

Ejemplo.

MUESTRA N 1: GANGRENA EN PULMN (Ud. deber colocar siempre el ttulo de la muestra a identificar)

Posteriormente usted deber dibujar la muestra a nivel macroscpico tal como la ve en la figura.

(Fig.1)

10X :A continuacin usted deber dibujar en aumento 10X, para tener una visin global de la muestra.

40X:Posteriormente, debe dibujar en un aumento de 40X, para definir detalles y rotular.

Una vez realizado sus dibujos, debe colocar: -ETIOLOGA y CARACTERSTICAS CLNICAS - HISTOPATOLOGA (Alteraciones celulares y estructurales, Ej: Hipercromatismo nuclear, Pleomorfismo Celular)

Este esquema representa la hoja de su cuaderno de croquis o croquera, en la cual usted deber dibujar lo que observa en el microscopio, con los aumentos correspondientes (10X, 40X), luego de ello rotule lo que observa y haga las descripciones histolgicas correspondientes.

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TINCIONES HISTOLGICAS
El propsito de una tincin histolgica es hacer fcilmente visibles estructuras histolgicas. Adems, permite diferenciar los componentes celulares (ncleo, citoplasma, grnulos secretorios, etc.) y la matriz extracelular (colgeno, etc.). Segn la tcnica de coloracin que escojamos podremos colorear los componentes que necesitemos observar. En Histologa hay varias tcnicas para poder observar las estructuras histolgicas, dentro de las cuales se destacan las siguientes: 1.- Hematoxilina Eosina (H-E) Esta tcnica opera bajo el principio cido-base, se combinan dos colorantes (hematoxilina eosina) Hematoxilina: Colorante bsico, tie los componentes cidos o basfilos de la clula. Ejemplo: ncleo (contiene acidos nucleicos y citoplasma que contiene RNA, glucosaminoglicanos cidos de la MEC. Eosina: Colorante cido, tie los componentes bsicos, acidfilos o eosinfilos, Ejemplo: membrana celular, citoplasma (no especializado y no tiene muchos ribosomas) componentes extracelulares bsicos como el colgeno.

2.- Histoqumica. La Histoqumica nos permite revelar grupos qumicos especficos y enzimas especficas en los tejidos. La presencia de enzimas de los tejidos se puede revelar adicionando el corte en el sustrato para esa enzima. Por lo tanto uno de los productos de la reaccin enzimtica coloreada (para poder verla al microscopio) e insoluble (para que precipite y no difunda hacia los costados) que se deposita al lado de la enzima.

3.- Inmunohistoqumica. El corte histolgico se coloca en un buffer especfico que otorgue un pH adecuado para que la reaccin del anticuerpo sea estable, agregamos el anticuerpo a la solucin y luego el anticuerpo reconoce la molcula y se asocia con ella como dos piezas de rompecabezas. Los anticuerpos normalmente se agregan covalentemente a una enzima (esa es la relacin con la histoqumica) que puede ser peroxidasa. Una vez que los anticuerpos reconocen su molcula, se agrega el sustrato para esa enzima, por lo tanto la enzima reconoce es sustrato y produce un nuevo producto coloreado e insoluble y se deposita justo en la regin en la que el anticuerpo est interactuando con la molcula que est reconocida.

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PRCTICO INTRODUCTORIO NORMAS GENERALES

- NORMAS DE MANEJO DEL MICROSCOPIO.
Observaremos una muestra de raz de cebolla. Para enfocar paso a paso: 1.- Lea toda esta secuencia antes de proceder a usar el microscopio 2.- Encienda el microscopio y ajuste la luz a una intensidad moderada. 3.- Gire el revolver y seleccione el objetivo menor (el de menor tamao, 4X). 4.- Baje la platina hasta el tope con el macromtrico. 5.- Coloque la preparacin en la platina, centrarla y sujetarla con las pinzas. 6.- Observe por el ocular, eleve la platina con el macromtrico hasta observarla muestra. A partir de este momento no movemos ms el macromtrico. 7.- Sin dejar de observar, gire el micromtrico hasta conseguir la mxima nitidez (la imagen en foco). Ajuste la intensidad de la luz si es necesario. 8.- Cuando ya hemos observado la imagen con el menor objetivo, cambie a los superiores sucesivamente, ajuste en cada cambio la intensidad de la luz y elfoco solamente con el micromtrico. 9.- Cada vez que cambie de muestra, debe realizar el mismoprocedimiento. Un mal uso del microscopio puede daar el aparato, las muestras, ydificultarnos la observacin. Estudio de la muestra. Raz de cebolla. Tincin: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la pgina 5 de esta gua. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe que la forma de las clulas vara de cbicas regulares a alargadas. Dibuje varias de ellas. 40X: Observe clulas en divisin. En ellas se pueden apreciar loscromosomas. En cada prctico usted deber de dibujar con lpices de colores todas sus observaciones. Trate de que los dibujos sean lo mas fiel posible a sus observaciones con en elmicroscopio, ya que ellos sern una herramienta valiosa en el momento de estudiar paralas evaluaciones prcticas.

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PRCTICO 1 ACUMULACIONES INTERCELULARES

01.- MUESTRA N1 ESTEATOSIS HEPTICA Estudio de la muestra. Esteatosis Heptica. Tincin: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la pgina 5 de esta gua. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopa, usted debe dibujar su muestra mediante una vista panormica.

Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las clulas caractersticas de la muestra. 40X:Observe los hepatocitos caractersticos de la muestra como verdaderas vacuolas, que en su interior contienen gotas lipdicas, algunas ms pequeas y otras de mayor tamao, se cree que el tamao radica en que algunas son metablicamente ms activas (las de mayor tamao), versus las ms pequeas (con un metabolismo ms disminudo) Tambin en algunos cortes encontrar estructuras propias del tejido heptico como arteriolas de pequeo espesor. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.

Registre en su cuaderno: Etiologa Caractersticas Clnicas Histopatologa Para ello debe ayudarse y complementar la informacin con la literatura bsica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patologa Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.

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PRCTICO 2 ACUMULACIONES INTERCELULARES

01.- MUESTRA N1: QUISTE PERIAPICAL Estudio de la muestra. Quiste Periapical. Tincin: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la pgina 5 de esta gua. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopa, usted deber dibujarla mediante una vista panormica.

Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las clulas caractersticas de la muestra. 40X:Observe los cristales de colesterol, tambin llamados hojales de colesterol, por la apariencia de hoja que presentan, vea la uniformidad estructural que presentan (de forma fusiforme) Tambin encontrar estructuras caractersticas como los macrfagos. Observe y dibuje el estroma constitutivos o el tejido conectivo denso irregular colagenoso con sus elementos

Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.

Registre en su cuaderno: Etiologa Caractersticas Clnicas Histopatologa Para ello debe ayudarse y complementar la informacin con la literatura bsica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patologa Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.

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PRCTICO 3 ACUMULACIONES INTERCELULARES

01.- GANGRENA EN PULMN. Estudio de la muestra. Gangrena en Pulmn. Tincin: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la pgina 5 de esta gua. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopa, usted deber dibujarla mediante una vista panormica.

Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las clulas caractersticas de la muestra. 40X:Observe el infiltrado bacteriano presente en el preparado. Al igual debe dibujar los macrfagos que estn en la totalidad de la muestra. Tambin encontrar estructuras caractersticas como las clulas gigantes multinucleadas, llamadas clulas de langhans. Observe y dibuje el tejido conectivo en donde encontrar tambin estructuras vasculares como vasos sanguneos en forma transversal y longitudinal. Observe los focos necrticos caractersticos de la muestra. Distinga y dibuje el tejido cartilaginoso con sus componentes estructurales, grupos isgenos, matriz territorial, matriz interterritorial, condrocito en la laguna. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.

Registre en su cuaderno: Etiologa Caractersticas Clnicas Histopatologa Para ello debe ayudarse y complementar la informacin con la literatura bsica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patologa Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.

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PRCTICO 4 ACUMULACIONES INTERCELULARES

01.- MELANINA NEVUS AZUL (NEVUS MELANOCITICO DRMICO) Estudio de la muestra. Melanina Nevus Azul (Nevus Melanocitico Drmico). Tincin: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la pgina 5 de esta gua. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopa, usted deber dibujarla mediante una vista panormica.

Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las clulas caractersticas de la muestra. 10X:Observe la dermis papilar con las papilas drmicas, al igual encontrar la dermis reticular presente en el preparado. Recuerde que ste preparado corresponde a piel y por consiguiente encontrar las estructuras caractersticas del epitelio pluriestratificado (con sus estratos correspondientes). Tambin encontrar estructuras caractersticas como el estrato crneo, para ello identifique esta estructura con el objetivo menor de 4X, vaya aumentando el objetivo hasta llegar al 40X. Establezca mediante sus conocimientos previos de Histologa si corresponde al estrato crneo paraqueratinizado u ortoqueratinizado. Observe y dibuje los melanocitos, que presentan su mxima condensacin, identifique el tejido conectivo. Por ltimo ubique el nevus (nido pequeo) que al interior y en su centro presenta la perla de queratina. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.

Registre en su cuaderno: Etiologa Caractersticas Clnicas Histopatologa Para ello debe ayudarse y complementar la informacin con la literatura bsica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patologa Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.

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PRCTICO 5 INMUNOPATOLOGA
01.- PLEURA TBC. Estudio de la muestra. Pleura Tuberculosis Pulmonar. Tincin: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la pgina 5 de esta gua. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopa, usted deber dibujarla mediante una vista panormica.

Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las clulas caractersticas de la muestra. 40X:Observe los focos necrticos presente en el preparado. Al igual debe dibujar los macrfagos que estn en la totalidad de la muestra. Tambin encontrar estructuras caractersticas como las clulas gigantes multinucleadas, llamadas clulas de langhans (de gran tamao), posteriormente ubique las clulas epiteloideas (usted las ver generalmente como clulas alargadas llenas de ncleos) Observe y dibuje el tejido conectivo en donde encontrar tambin estructuras vasculares como vasos sanguneos en forma transversal y longitudinal. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.

Registre en su cuaderno: Etiologa Caractersticas Clnicas Histopatologa Para ello debe ayudarse y complementar la informacin con la literatura bsica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patologa Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.

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PRCTICO 7 INMUNOPATOLOGA
01.- GRANULOMA DE CUERPO EXTRAO Estudio de la muestra. Granuloma de Cuerpo Extrao Tincin: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la pgina 5 de esta gua. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopa, usted deber dibujarla mediante una vista panormica.

Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las clulas caractersticas de la muestra. 40X:Observe los espacios del cuerpo extrao presente en el preparado, que estn rodeados por una cpsula fibrosa. Tambin encontrar estructuras caractersticas del tejido conectivo con sus fibras colgenas en abundancia, en ella tambin encontrar infiltrado inflamatorio. Observe y dibuje los macrfagos en donde encontrar tambin clulas musculares cortadas de manera transversal y longitudinal. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.

Registre en su cuaderno: Etiologa Caractersticas Clnicas Histopatologa Para ello debe ayudarse y complementar la informacin con la literatura bsica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patologa Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.

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PRCTICO 8 HISTOLOGA y FISIOLOGA SANGUNEA

01.- FROTIS SANGRE HUMANA Estudio de la muestra.Frotis Sanguneo, Sangre Humana. Tincin: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la pgina 5 de esta gua. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopa, usted deber dibujarla mediante una vista panormica.

Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 40X: Identifique y dibuje; Eritrocitos (forma discoidal), Plaquetas (citoplasma violceo y aspecto granular), Linfocitos (ncleo redondo, denso y escaso citoplasma). Neutrfilos (ncleos multilobulados, cada lbulo conectado por finas bandas de material nuclear), Eosinfilos (ncleo bilobulado, abundantes grnulos rojos brillantes). Monocitos (ncleo ncleoexntrico y escotado o arrionado, posee la cromatina menos condensada de todos los glbulos blancos), Basfilos (Ncleo bilobulado, grnulos azules de gran tamao). Los basfilos son visibles slo en algunas preparaciones (menos del 1% del total de leucocitos de la sangre). Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.

Registre en su cuaderno: Escriba en detalle todos los componentes sanguneos celulares. Escriba en detalle la funcin de todos los componentes sanguneos celulares. Para ello debe ayudarse, recordarse y complementar la informacin con la literatura bsica de Histologa y Fisiologa (Histologa; Ross- Pawlina) y Fisiologa (Bases Fisiolgicas de la Prctica Mdica; Best & Taylor)

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PRCTICO 9 TRASTORNOS CIRCULATORIOS

01.- TROMBOS ROJOS. Estudio de la muestra. Trombos Rojos. Tincin: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la pgina 5 de esta gua. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopa, usted deber dibujarla mediante una vista panormica.

Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las clulas caractersticas de la muestra. 10X: En este objetivo usted encontrar un entrelazado de fibras muy pequeas (en red), esta corresponde a la malla de fibrina que es caracterstica de los procesos coagulativos. 40X:Observe los eritrocitos (glbulos rojos) presentes en el preparado.

Tambin encontrar linfocitos (ncleo redondo, denso y escaso citoplasma). Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.

Registre en su cuaderno: Etiologa Caractersticas Clnicas Histopatologa Para ello debe ayudarse y complementar la informacin con la literatura bsica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patologa Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.

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PRCTICO 10 NECROSIS TISULAR

01.- INFARTO CARDACO Estudio de la muestra.Infarto Cardaco. Tincin: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la pgina 5 de esta gua. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopa, usted deber dibujarla mediante una vista panormica.

Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las clulas caractersticas de la muestra. 10X: Encontrar clulas musculares estriadas cortadas de manera transversal y longitudinal, dibjelas. 40X: Ubique las clulas caractersticas de la muestra y las alteraciones estructurales que presentan, encontrar clulas picnticas (ncleo cntrico y muy condensado), clulas con estado de cariorrexis (ncleo en rueda de carreta) y clulas en estado de carilisis (muchos ncleos que son muy pequeos) Encuentre y dibuje clulas caractersticas del preparado, macrfagos, infiltrado inflamatorio y linfocitos. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.

Registre en su cuaderno: Etiologa Caractersticas Clnicas Histopatologa Para ello debe ayudarse y complementar la informacin con la literatura bsica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patologa Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.

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PRCTICO 11 NECROSIS TISULAR

01.- INFARTO RENAL Estudio de la muestra. Infarto Cardaco. Tincin: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la pgina 5 de esta gua. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopa, usted deber dibujarla mediante una vista panormica.

Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las clulas caractersticas de la muestra. 10X: Encontrar clulas musculares estriadas cortadas de manera transversal y longitudinal, dibjelas. 40X: Ubique las clulas caractersticas de la muestra y las alteraciones estructurales que presentan, encontrar clulas picnticas (ncleo cntrico y muy condensado), clulas con estado de cariorrexis (ncleo en rueda de carreta) y clulas en estado de carilisis (muchos ncleos que son muy pequeos) 40X:Encuentre y dibuje clulas caractersticas del preparado, macrfagos, infiltrado inflamatorio y linfocitos. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.

Registre en su cuaderno: Etiologa Caractersticas Clnicas Histopatologa Para ello debe ayudarse y complementar la informacin con la literatura bsica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patologa Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.

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