UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

CENTRO UNIVERSITARIO DEL SUR

TECNICO EN PROCESO AGROINDUSTRIALES
MICROBIOLOGIA
SEGUNDO SEMESTRE 2010

MANUAL DE PRACTICAS DE LABORATORIO

MICROBIOLOGIA

AGOSTO, 2010

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 PRESENTACION

Las actividades de laboratorio están diseñadas con el objetivo de

llevar a la práctica los conceptos fundamentales que se imparten
en teoría y de esta manera involucrarse experimentalmente con
la ciencia.

En los instructivos de cada práctica encontrara una introducción,

objetivos, procedimiento y por ultimo una sección de
antecedentes, los cuales deben ser resueltos antes de ingresar
al laboratorio, ya que contienen aspectos indispensables para
comprender la práctica. Todas las prácticas indican que
material, equipo o reactivo se utilizara y el procedimiento a
seguir, para llevar acabo los experimentos.

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INSTRUCCIONES GENERALES

Las actividades que se desarrollan en las sesiones de laboratorio

de Microbiología serán en el laboratorio de ciencia básica.

En todas las prácticas es indispensable que cada alumno tenga

los siguientes materiales para poder ingresar al laboratorio a
realizar la practica.

1. Bata blanca
2. Manual de la practica impresa
3. Antecedentes de la practica a realizar, en hojas blancas,
tamaño carta a mano,

Al iniciar cada práctica se realizara un examen corto sobre los

antecedentes y el instructivo de cada práctica.
En la primera sesión de laboratorio se formaron los grupos de
trabajo para realizar los laboratorios.

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

CENTRO UNIVERSITARIO DEL SUR

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TECNICO EN PROCESO AGROINDUSTRIALES
MICROBIOLOGIA
SEGUNDO SEMESTRE 2010

Prática No. 1
Microscopia parte I

I INTRODUCCION

Existen casos en los cuales la observación de los objetos a

simple vista no nos permite examinar algunos detalles que nos
interesan. Los instrumentos de óptica se han creado con el fin
de facilitarnos y mejorar la observación de estos detalles. Lupas,
estereoscopios y microscopios de distintos tipos, son aparatos
con los cuales se observan objetos que no podemos ver a simple
vista.

La microscopia data del siglo XVII. Hooke y Malpighi emplearon

lentes simples en el estudio de características estructurales de
ciertos microorganismos. En 1664 Hokke describió las
estructuras de los mohos. Pero la primera persona que vio con
cierto detalle los microorganismos fue el holandés Anton Van
Leeuwenhoek, quien empleo microscopio simples hechos por el
mismo. Luego entre 1673 y 1716, Leeuwnhoek fabrico lentes
compuestos. A partir del siglo XIX, el microscopio se fue
perfeccionando, haciéndose cada vez mas sofisticado.

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El uso correcto de los instrumentos ópticos es una técnica básica
que debe adquirir todo estudiante de ciencias e ingeniería.
Como toda técnica compleja, necesita continua ejercitación para
lograr niveles operativos aceptables. La observación a través del
microscopio deber ir acompañada por la esquematización y
descripción de los objetos observados, con el fin de integrar un
material de estudio basado en la experiencia personal.

Para poder observar un objeto o una muestra a través de un

microscopio, estos deben tratarse con técnicas diferentes,
algunas más especializadas que otras, dependiendo de la
muestra. Estas técnicas aseguran la integridad de las muestras
y la seguridad de poder observar lo que se desea.

Los estereoscopios permiten hacer estudios de objetos y

especimenes demasiado pequeños para ser estudiados a simple
vista, pero demasiado grandes para ser estudiados bajo el
microscopio compuesto. Su magnificación va desde de 5x hasta
mas de 60x. Los estereoscopios también son conocidos como
microscopios de disección, pues en muchas ocasiones son
usados para disectar los especimenes o muestras, separando de
ellos aquellas partes que serán examinadas mediante otros
tipos de microscopia.

En esta practica, los y las estudiantes aprenderán las técnicas

de enfoque del microscopio y del estereoscopio.

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II OBJETIVOS
Que el estudiante:
2.1 Identifique las partes del microscopio y del estereoscopio a
través de la manipulación de ambos instrumentos, con la
guía del instructor del laboratorio.
2.2 Desarrolle destrezas en el uso y transporte del microscopio
y del estereoscopio.
2.3 Compare el microscopio y el estereoscopio en cuanto a uso
y resolución.
2.4 Enfoque correctamente y observe diversos objetos y
estructuras microbiológicas al microscopio y al
estereoscopio.

III MATERIAL Y EQUIPO

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* Microscopio compuesto *aceite de inmersión
*Estereoscopio * Agua destilada en goteros
*Porta y cubreobjetos *Papel periódico impreso
*Pinzas *Flores de plantas diferentes
Especies
* Cajas de petri *Cristales de sulfato de cobre
* Vidrios de reloj *Cristales de cloruro de sodio
*Papel limpia lentes *Insectos de diferentes
Especies
*Tijeras, espátulas *Laminas fijas
*Agujas de disección *Objetivos de inmersión

IV. PROCEDIMIENTO

4.1 Microscopio
a) Transporte el microscopio a su mesa de trabajo empleando
para ello ambas manos, una por debajo de la base y la otra en el
brazo.
b) Colóquelo sobre su mesa de trabajo en Angulo recto con
relación al largo de la misma y alejado del borde. Cuando trabaje
con el microscopio quite de la mesa de trabajo los objetos que
no sean absolutamente necesarios. Retire la funda que cubre el
microscopio, dóblela y colóquela bajo la esa de trabajo.
c) identifique cada una de las partes del microscopio (vea la
figura 2).
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d) Localice el número que indica el aumento del ocular.
e) Revise cada uno de los objetivos, localice la cifra que indica el
aumento de cada uno de ellos (seco débil 10X, seco fuerte 40X o
43X y el de inmersión 100X). Su instructor le indicara como
obtener el aumento total con la combinación objetivo-ocular, de
la siguiente forma:

Aumento total = ocular x objetivo.

f) El microscopio posee dos tipos de tornillos que se utilizan para

enfocar: el micrómetro y el micrómetro. La función del
micrómetro es acercar el objetivo a la muestra, desplazando el
cabezal o levantando la platina(según el tipo de microscopio). La
función del micrómetro es afinar el enfoque logrado con el
macrometrico.
g) Cuando utilice el objetivo seco fuerte y de inmersión, enfoque
UNCIAMENTE con el tornillo micrométrico lentamente.

4.2 Observación de montajes húmedos

a) Coloque el objetivo de menor aumento en su posición de

enfoque. Sentirá un “clic” cuando este encaje en su sitio.
b) Mueva el espejo de manera que la luz se refleje hacia
arriba a través de la abertura de la platina. La mayoría de
los microscopios estan equipados con un diafragma para
regular la luz. Obtenga la cantidad correcta de luz para

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 visualizar apropiadamente el objeto. Algunos materiales se
observan mejor con luz opaca; otros con luz brillante.
c) Cerciórese que las lentes estén limpias. Límpielas
únicamente con papel limpialentes.
d) Seleccione un recorte de periódico que contenga una letra
asimétrica
e) Coloque el recorte en un portaobjetos limpio encima de una
gota de agua. Esto se llama montaje húmedo.
f) Espere un momento antes de colocar el cubreobjetos para
que el papel se moje. Mantenga el cubreobjetos en un
ángulo de 45 º respecto al portaobjetos y bájelo lentamente.
g) Coloque el portaobjetos sobre la platina y sujételo con las
pinzas de ajuste. Mueva el portaobjetos de tal manera que
la letra quede en el centro del orificio de la platina.
h) Enfoque lentamente con el tornillo macrometrico
i) Use el tornillo micrométrico para afinar el enfoque.
Compare como se ve la letra a través del microscopio y a
simple vista. ¿Qué parece sucederle a la letra? Mueva el
portaobjetos hacia la derecha. ¿en que dirección se
desplaza la imagen? ¿Qué puede decir acerca de la
posición relativa y el movimiento de los objetos cuando
estos se ven a través del microscopio compuesto?

4.3 Observación de laminas fijas

a) Su instructor le proporcionara una lámina fija. Límpiela
suavemente con el papel limpia lentes.

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 b) Colóquela en el microscopio. No debe colocar cubreobjetos
en este tipo de láminas.
c) Enfoque y observe con objetivo seco débil, seco fuerte y el
objetivo de inmersión. En este montaje se utiliza un aceite
especial llamado aceite de inmersión, SU INSTRUCTOR LE
GUIARA EN ESTE PROCEDIMIENTO, espere
instrucciones.
d) Al finalizar la observación, limpie los lentes con papel limpia
lentes. Baje la platina y coloque el objetivo de menor
aumento en posición de observación.
e) Cubra el miscroscopio con funda y transpórtelo
adecuadamente al gabinete.

4.4 Estereoscopio
a) Transporte el estereoscopio utilizando ambas manos, sujételo
por el soporte.
b) Separe los oculares regulando la distancia entre ambos,
hasta lograr una visión clara y cómoda.
c) Identifique con ayuda de su instructor y del esquema de la
figura 3:
Oculares
Objetivos
Tornillo de descenso de objetivos
Base
Platina

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d) Coloque la hoja de una planta sobre un vidrio de reloj o caja
de petri y coloque a su vez este sobre la platina
e) Haga descender el objetivo lo más que pueda por medio del
tornillo
f) Enfoque a través de los oculares, mueva los tornillos hasta
lograr una imagen nítida de objeto con el ojo derecho.
g) Tápese el ojo derecho yu ajuste el enfoque del ojo izquierdo
con el colar comoenador.
h) Observe las distintas estructuras de la hoja
i) Haga lo mismo con un insecto, cristales de cloruro de sodio y
sulfato de cobre.
j) Al terminar su trabajo, apague la luz, limpie y cubra el
estereoscopio.

V. ANTECEDENTES

5.1 Investigue tres tipos de microscopios ópticos y en un cuadro

coloque lo siguiente: tipo de microscopio, características y
aplicaciones.
5.2 Explique los usos, funcionamiento y diferencias entre
estereoscopio y microscopio.
5.3 ¿Cuáles son los cuidados y precauciones que se deben
tomar en cuenta en el empleo de un microscopio compuesto y un
estereoscopio?
5.4 Algunos microscopios poseen dos tipos de espejos que se
utilizan para reflejar la luz hacia las muestras. ¿Cuáles son estos

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dos tipos de espejos y para que tipo de luz se emplean?
Explique su respuesta.
5.5 ¿Para que se utiliza el objetivo de inmersión? Explique de
qué manera se obtiene un mayor aumento al utilizarlo.
5.6 Cual es la función del aceite de inmersión
5.7 Defina que es un estereoscopio binocular o de disección
5.8 Sobre que objeto se colocan las muestras antes de ubicarlas
en la platina del estereoscopio
5.9 Los estereoscopios poseen una platina con un lado negro y
el otro blanco. Para que sirven estos dos colores?
5.10 Realice dos figuras una de un microscopio óptico y la otra
de un estereoscopio. Indicando cada una de sus partes que se
verán en la practica y estúdielas.

NO OLVIDE INCLUIR SUS REFERENCIAS

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Figura 1.1 Microscopio compuesto.

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Figura 1.2 Estereoscopio simple.

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