ISABEL I LA CATÓLICA, O ISABEL I DE CASTILLA, NACIÓ EN MADRIGAL DE LAS ALTAS TORRES (ÁVILA) EL 22 DE ABRIL DE 1451, HIJA DEL SEGUNDO MATRIMONIO DEL REY JUAN II DE CASTILLA (1405-1454) CON ISABEL DE PORTUGAL. El monarca Juan II ya tenía programada su sucesión en manos de su hijo Enrique, fruto de su matrimonio anterior con María de Aragón. Sus abuelos paternos eran los reyes de Castilla, Enrique III y Catalina de Lancaster, y los maternos, el infante Juan de Portugal (hijo a su vez de Juan I de Portugal) e Isabel de Barcelos (de la casa de Braganza).
Su madre, Isabel de Portugal, en 1453 dio a luz al infante Alfonso, que en la línea sucesoria pasaría a adelantarla por ser varón. Al año siguiente falleció de forma inesperada Juan II, pasando a ser rey de Castilla su hijo Enrique IV (1425-1474), cuando Isabel contaba con tres años. Así pues, su hermano Alfonso podría aspirar al trono si Enrique IV no lograba tener un hijo varón.
Isabel de Portugal, su madre, que ya había presentado algún episodio de inestabilidad mental, ante la muerte de su esposo, cayó en depresión, agravando su estado mental, y se trasladó con sus hijos, Isabel y Alfonso, y algunos cortesanos, al castillo de la Mota, en Arévalo (Ávila), lejos de la corte y cerca de Medina del